艾连中 教授
上海理工大学医疗器械与食品学院
副院长
艾连中，博士，教授、博士生导师，上海理工大学医疗器械与食品学院副院长、上海食品微生物工程技术研究中心主任、中国食品科学技术学会理事、中国食品科学技术学会青年委员会主任委员。入选国家“万人计划”科技创新领军人才，国家有突出贡献中青年专家、国家百千万人才工程，国务院政府特贴专家，科技部中青年科技创新领军人才，教育部新世纪优秀人才等人才计划。从事食品优良微生物选育与利用、乳制品的研究与开发、生物活性多糖的结构与功能等方面的研究工作，主持“973”计划课题、科技支撑计划课题、国家自然科学基金面上项目等科研项目20余项；获得省部级以上科技奖励11 项；获得授权发明专利43 项；发表科研论文150余篇，SCI收录60余篇；参编英文专着2 部。
报告题目
干酪乳杆菌中CRISPR-Cas9D10A基因编辑系统的建立
摘 要
干酪乳杆菌（Lactobacillus casei，L. casei）是一类有益宿主健康作用的乳酸菌，干酪乳杆菌基因功能的解析和工业菌种的改造，需要高效精确的基因操作工具，常规的基因操作工具依赖于两次同源重组的基因编辑方法耗时耗力。本研究提供了一种应用于干酪乳杆菌的单质粒基因编辑工具pLCNICK。pLCNICK利用启动子P23和Pldh分别启动Cas9D10A突变体和sgRNA的转录，并同时提供目标基因的同源臂作为DNA修复的供体。利用该方法，本研究实现干酪乳杆菌LC2W四个基因LC2W_1326、LC2W_1628、LC2W_2179和LC2W_2189的无痕敲除及GFP基因在LC2W_1628位点的插入，基因编辑效率为25%～62%。同时，利用该系统对干酪乳杆菌AR342进行RFP标记，标记效率达到37.2%，与GFG标记效率相当。pLCNICK提供了一种成功应用于干酪乳杆菌高效精确的基因编辑工具，并且具有在其他乳酸菌中应用的潜力。
