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鸡支气管炎抗体检测试剂盒
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产品: 浏览次数:688鸡支气管炎抗体检测试剂盒 
品牌: 健仑
商品型号: 鸡支气管炎抗体检测试剂盒
产品规格: 鸡支气管炎抗体检测试剂盒
单价: 面议
最小起订量: 1
供货总量: 500000
发货期限: 自买家付款之日起 1 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2017-05-17 06:54
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详细信息
                                  鸡传染性支气管炎抗体检测试剂盒

                                        使用说明书

【用途】
用来检测鸡血清中的禽传染性支气管炎病毒(IBV)抗体

【试验原理】
临床上,传染性支气管炎是一种急性、高度传染的病毒性疾病,任何日龄的鸡都可以感染。IBV的潜伏期为24-72小时。疾病侵害鸡的呼吸系统和泌尿系统。青年鸡表现为急性呼吸道症状及气管损伤。死亡率可高达100%。血清中的病毒抗体可通过酶联免疫的方法检测。血清中的IBV抗体水平及整个鸡群的免疫状况可用ELISA方法进行监测。
将灭活的抗原包被在微孔板上,加入稀释后的血清并孵育,血清中的抗IBV抗体将与包被在微孔板上的IBV结合,形成IBV抗原-抗体复合物。然后洗掉未结合的物质,加碱性磷酸酶标记的抗鸡IgG的酶标结合物至微孔板中,酶标物将与IBV抗原-抗体复合物结合。孵育后洗掉未结合的结合物,然后加入底物溶液。底物与碱性磷酸酶反应并生成一种黄色的产物,最后终止反应,将颜色固定。颜色的深浅可用酶标仪(405-410nm)测定。

【一个微孔板所需的试剂的量】

抗原包被微孔板

12×8条(板)

样品稀释液(1×)

120ml

洗涤液(1×)

500ml

阳性对照

2μl

阴性对照

2μl

结合物

12ml

底物液

12ml

终止液

12ml


【所需物品】
1. 
能够吸取2μl、100μl和800μl的精确移液器
2. 
最大吸取100μl的多通道移液器
3. 
计时器
4. 
量筒
5. 
蒸馏水
6. 
洗板机
7. 
稀释用容器
8. 
能够读双波(405-410nm和630-650nm)的酶标仪,OD值读数最大可达到3.0

【样品收集】
采集至少0.5ml全血,分离血清并放在冰箱里,2-7℃用于短期储存,如果长期储存,应冷冻,且避免反复冻溶。如果样品含有可见的颗粒物质,应在检测之前将其离心除去,严重污染的样品不允许使用(如高度浑浊、细菌污染等)


【结果计算】
将阳性对照吸光度值和样品吸光度值分别减去阴性对照吸光度值,注意:对照品及样品吸光度值都应该是2个重复孔的平均值。每个样品的计算式如下:

样品平均吸光度值 - 阴性对照吸平均吸光度值

=样品与阳性对照比值(Sp

阳性对照平均吸光度值 - 阴性对照平均吸光度值

Sp ×(100)= ELISA Unit (EU)              阳性对照值设为100 EU

【结果判定及EU单位说明】
IBV ELISA
值                          说明
小于10EUs                            IBV抗体为阴性
10-15 EUs                             IBV
抗体为弱阳性,应被认为经过免疫或暴露于IBV,油乳状疫苗也可能引起非特异性低水平抗体。
15-75 EUs                             IBV
抗体适度阳性
>75 EUs                              IBV抗体强阳性

【操作步骤】
1. 
将试剂回温至室温,通过颠倒和涡旋将试剂混匀。
2. 
将1份4×样品稀释液加入到含3份去离子水的容器中,充分混匀,例如,30ml 4×样品稀释液加入到90ml去离子水中。
3. 
将1份20×洗涤液加入到含19份去离子水的容器中,充分混匀,例如,25ml 20×洗涤液加入到475ml去离子水中。
4. 
稀释前将阳性对照、阴性对照和样品震荡均匀。
5. 
阳性对照、阴性对照和样品均需要用样品稀释液稀释后使用。稀释比例为2μl :800μl。将移液器调到100μl,反复吹打4次使之充分混匀。
6. 
将稀释后的阴性对照、阳性对照分别加入微孔中,每种做两个平行,每孔100μl;将稀释后的样品100μl分别加入孔中,室温下静置30分钟。
7. 
弃去微孔板中溶液,每孔加入300μl洗涤液洗涤,重复洗涤2次,在洗涤过程中防止酶标板变干。
8. 
每孔立即加入100μl结合物,室温静置30分钟。
9. 
重复步骤7进行洗板。
10. 
每孔立即加入100μl底物,室温静置30分钟。
11. 
不要倒掉板内液体,每孔立即加入100μl终止液。
12. 
用酶标仪双波读数(405nm或410nm作为主要波长,630nm或650nm为参考波长),计算结果。

【公司名称】 广州健仑生物科技有限公司

【联系电话】 13802525278 13710007117 020-82574011

【公司传真】 020-28216107

【电子邮件】 Service@jianlun.com

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