热搜: 食品  奶粉  烟台  海产品  保健品  周黑  黑窝点  黑作坊  全聚德  小龙虾 
 
当前位置: 首页 » 检测应用 » 快速检测专区 » 检测动态 » 正文

肉制品掺假可以准确测出来

放大字体  缩小字体 发布日期:2017-03-27  来源:食品科学
核心提示:近年来,世界各地肉制品掺假情况频繁发生,2013年,欧洲多国在部分牛肉产品中检出马肉成分,爆发了所谓的马肉风波。在我国,随着生活质量的提高,人们对动物蛋白的需求也日益增加,食用蛋白质含量相对较高的牛羊肉成了新的发展趋势。
  近年来,世界各地肉制品掺假情况频繁发生,2013年,欧洲多国在部分牛肉产品中检出马肉成分,爆发了所谓的马肉风波。在我国,随着生活质量的提高,人们对动物蛋白的需求也日益增加,食用蛋白质含量相对较高的牛羊肉成了新的发展趋势。与此同时,肉类产品标注信息与实际不符的情况也随之而来,如用猪肉等营养价值较低的廉价肉类掺入或代替羊肉等。这种掺假行为不仅扰乱肉业市场秩序,损害消费者利益,甚至可能侵犯消费者的宗教信仰。目前,肉制品中动物物种成分的检测多集中在定性或半定量检测方面,然而随着掺假手段的不断变化,实际应用中对肉制品真实含量的检测需求却越来越多,定量检测逐渐成为了新的发展趋势。
 
  微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)是近几年在实时荧光PCR基础上发展起来的定量技术,可直接测得样品中目标基因的绝对拷贝数,目前已应用于基因表达量、微生物丰度、转基因产品含量及食品成分的定量检测。
 
  来自中国农业大学食品与营养工程学院、中国检验检疫科学研究院的任君安、邓婷婷、黄文胜等人,以单拷贝持家基因DNA复制蛋白A(replication protein A,RPA1)为靶基因,开展了猪肉、羊肉掺假的ddPCR定量检测研究,为肉制品市场监管提供技术支撑。
 
  结果与分析
 
  1、引物探针特异性实验
 
  通过数字PCR对羊肉、猪肉等13 种肉类的DNA扩增结果显示,羊的引物探针特异性良好,可以同时扩增出绵羊肉和山羊肉,且其他肉类样品均没有扩增(图1);猪肉的引物探针只对目标样品猪肉有扩增,其余12 种肉类样品均没有扩增(图2)。以上结果说明表1中的引物和探针均能有效扩增靶标物种的RPA1基因,且对其他非目标物种无扩增。两组引物探针的特异性良好,可以用于后续的ddPCR定量检测实验。





 
 
  2、市售羊肉制品的定量检测
  采用本实验建立的方法检测市售羊肉串、羊肉馅、羊肉卷、羊肉馅饺子以及羊肉肠等14 份标识为纯羊肉制品中的羊肉和猪肉的相对含量,结果表明所有样品经DNA提取和微滴数字PCR扩增后,均能够检测出羊肉和/或猪肉含量(表5)。羊肉馅、羊肉串、羊肉馅饺子和羊肉肠中检测出猪肉成分,占样品总数的35.7%。其中,12号样品羊肉肠中未见羊肉成分,只有猪肉,1号和7号样品中除了羊肉,还添加有20%~60%的猪肉。11号和14号样品检出的猪肉含量低于本方法的定量低限,推断可能是污染导致。
  讨  论
 
  数字PCR在定量检测方面精准度更高,与基于标准曲线的实时荧光PCR相比,数字PCR技术使用终点法检测,不依赖于Ct值(荧光强度达到指定值时的PCR循环数),是一种可以测定绝对拷贝数的DNA精确定量技术,避免了不同样品之间的扩增效率变化而导致的定量结果不准确。本方法能准确获得靶基因的绝对拷贝数并转化为其质量分数,因此在最低检测限1%时的相对误差更小,有效提高了定量的检测低限及其准确性。
 
  本研究选择单拷贝持家基因作为目的基因,其拷贝数不会因物种性别、年龄和部位发生变化,是良好的定量靶标,确保了定量的准确度和稳定性。
 
  在肉类定量检测中,除了需要准确获得靶基因的绝对拷贝数外,将测得的靶基因相对丰度转换为相应的质量分数也是准确定量的关键之处。本研究建立的方法利用两种肉基因拷贝数之比这一固定值,一步实现了基因拷贝数之比与质量之比的转化,在定量5%猪肉含量时的相对误差为-7.5%,且最低定量检测限为1%,既简化了实验步骤,又提高了定量的准确性和检测低限。
 
ddPCR为肉制品掺假精准定量提供了有力的技术手段,本研究表明通过理论推导并结合实验验证了单位质量下猪肉与羊肉拷贝数之比,使数字PCR测得的基因拷贝数可以直接转换为各组分的质量分数,定量结果准确。本实验所建立的方法不仅可以定量羊肉中掺杂猪肉,也可以应用于其他肉类及其他食品掺假的定量检测,为执法部门判定肉产品及其他食品中掺假还是无意污染、打击食品掺假现象及食品安全犯罪量刑等提供技术支撑。随着数字PCR技术的日益发展,定量检测食品中的动物源性成分将会成为我国行业标准发展的必然趋势,为我国肉制品掺假的市场监管和相关执法提供有力的技术保障。 
 
 
[ 检测应用搜索 ]  [ 加入收藏 ]  [ 告诉好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 违规举报 ]  [ 关闭窗口 ]

 
0条 [查看全部]  相关评论

 
推荐图文
推荐检测应用
点击排行
  

鲁公网安备 37060202000213号