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小麦粉中赭曲霉毒素A 的检测(GB5009.96-2016)-SPE 小柱法

放大字体  缩小字体 发布日期:2017-10-19
核心提示:赭曲霉毒素是由多种生长在粮食(小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等)、花生、蔬菜(豆类)等农作物上的曲霉和青霉产生的。
   赭曲霉毒素是由多种生长在粮食(小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等)、花生、蔬菜(豆类)等农作物上的曲霉和青霉产生的。赭曲霉毒素主要侵害动物肝脏与肾脏,引起肾脏损伤,大量的毒素也可能引起动物的肠黏膜炎症和坏死。其中毒性最大的是赭曲霉毒素A,EU/EC 欧盟指令条例中规定食品中赫曲霉毒素A 每周摄入量不超过120 ng/kg,而我国标准中指明谷物及豆类及其制品中限量为5.0μg/kg。
 
  安谱实验根据国标GB5009.96-2016 第二法, 使用CNW Poly-Sery MAX 混合型阴离子交换SPE 小柱利用高效液相- 荧光的方法检测出面粉中赫曲霉毒素A,回收率达到78% 以上,方法简单易行,为赭曲霉毒素A 的检测提供了除免疫亲和小柱外SPE 小柱的方法。
 
  小麦粉中赭曲霉毒素A 的检测
 
  (GB5009.96-2016)-SPE 小柱法
 
  1
 
  样品前处理
 
  称取5g 小麦粉,加入提取液( 氢氧化钾溶液(0.1mol/L)- 甲醇-水(2+60+38))25 mL,于漩涡振荡器上振荡提取1 min,滤纸过滤,取上清液10mL 于50mL 离心管中,加人20 mL 石油醚,漩涡振荡器振荡提取1min,静置分层后取下层溶液,取滤液5mL 进行固相萃取净化。
 
  2
 
  小柱操作
 
  小柱:CNW Poly-Sery MAX 混合型阴离子交换SPE 小柱(SBEQ-CA3385;200mg/6mL)
 
  活化:5mL 甲醇
 
  平衡:3mL 提取液(氢氧化钾溶液(0.1 mol/L)+ 甲醇+ 水=2+60+38)
 
  上样:5mL
 
  淋洗:分别用3mL 淋洗液{ 氢氧化钾溶液(0.1mol/L)- 乙腈- 水(3+50+47)}、3mL 水、3mL 甲醇淋洗小柱,抽干
 
  洗脱:用5mL 洗脱液( 甲醇- 乙腈- 甲酸- 水{40+50+5+5)} 洗脱,收集洗脱液,45℃氮气吹干,加1ml 流动相复溶,过滤后,待上机分析。
 
  3
 
  HPLC-FLD 测定条件
 
  色谱柱:CNW Athena C18-wp
 
  (LAEQ-462572; 4.6mm*250mm, 5um)
 
  流动相:A:冰乙酸- 水(2+100) B:乙腈 A:B=1:1
 
  流速:1.0mL/min;
 
  激发波长:333nm,发射波长:460nm
 
  柱温:30℃
 
  进样:20uL
 
  4
 
  实验谱图
  图1:赫曲霉霉素A 5ppb 标准品谱图
  图2:基质加标5ppb 谱图
  图3:基质空白谱图
 
  5
 
  实验数据
  6
 
  实验耗材
 
 
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