安谱实验根据国标GB5009.96-2016 第二法, 使用CNW Poly-Sery MAX 混合型阴离子交换SPE 小柱利用高效液相- 荧光的方法检测出面粉中赫曲霉毒素A,回收率达到78% 以上,方法简单易行,为赭曲霉毒素A 的检测提供了除免疫亲和小柱外SPE 小柱的方法。
小麦粉中赭曲霉毒素A 的检测
(GB5009.96-2016)-SPE 小柱法
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样品前处理
称取5g 小麦粉,加入提取液( 氢氧化钾溶液(0.1mol/L)- 甲醇-水(2+60+38))25 mL,于漩涡振荡器上振荡提取1 min,滤纸过滤,取上清液10mL 于50mL 离心管中,加人20 mL 石油醚,漩涡振荡器振荡提取1min,静置分层后取下层溶液,取滤液5mL 进行固相萃取净化。
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小柱操作
小柱:CNW Poly-Sery MAX 混合型阴离子交换SPE 小柱(SBEQ-CA3385;200mg/6mL)
活化:5mL 甲醇
平衡:3mL 提取液(氢氧化钾溶液(0.1 mol/L)+ 甲醇+ 水=2+60+38)
上样:5mL
淋洗:分别用3mL 淋洗液{ 氢氧化钾溶液(0.1mol/L)- 乙腈- 水(3+50+47)}、3mL 水、3mL 甲醇淋洗小柱,抽干
洗脱:用5mL 洗脱液( 甲醇- 乙腈- 甲酸- 水{40+50+5+5)} 洗脱,收集洗脱液,45℃氮气吹干,加1ml 流动相复溶,过滤后,待上机分析。
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HPLC-FLD 测定条件
色谱柱:CNW Athena C18-wp
(LAEQ-462572; 4.6mm*250mm, 5um)
流动相:A:冰乙酸- 水(2+100) B:乙腈 A:B=1:1
流速:1.0mL/min;
激发波长:333nm,发射波长:460nm
柱温:30℃
进样:20uL
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实验谱图
图1:赫曲霉霉素A 5ppb 标准品谱图
图2:基质加标5ppb 谱图
图3:基质空白谱图
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实验数据
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实验耗材