动物源性食品具有基质复杂、干扰物质多、不易分离提纯等特点，因而前处理方法和质谱技术是影响兽药检测的关键。传统的样品前处理方法包括液液萃取（LLE）和固相萃取（SPE）等，近年来QuEChERS（quick,easy, cheap, effective, rugged, safe）法因其快速、便捷、有效等特点被由农药残留检测逐步应用于兽药残留检测领域。然而QuEChERS方法还有许多方面需要改进，目前QuEChERS方法主要应用于低脂肪食品中，因此寻找适合于高脂肪的吸附剂对于兽残检测来说尤为重要。
从目前文献来看，前处理方法种类繁多，应用于不同的质谱技术上有不同的结果，缺少对市售商业去脂产品的系统比较，不能很好地整合人力成本和时间成本。我国是猪养殖与消费大国，猪组织消耗量占世界总产量一半以上，因此开发建立猪组织中喹诺酮便捷可靠检测方法是保障猪组织质量安全的重要基础。基于此，南京财经大学食品科学与工程学院，江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心，江苏高校粮油质量安全控制及深加工重点实验室的王 杰、裴 斐、李 彭等人选用Oasis PRiME HLB固相萃取柱以及EMR-L萃取盐包，以传统的乙腈一步提取、正己烷去脂的LLE法作为对照，结合不同的质谱平台系统综合地研究比较三者的差异，旨在探索“猪肉基质-前处理手段-质谱检测类型”之间的适用匹配关系，为拓展兽残检测方法、提升检测技术水平、保障食品安全，提供技术参考和理论依据。
1、基质提取物
Oasis PRiME HLB方法的净化效果明显优于以单一溶剂提取的LLE法，这是因为其亲脂性二乙烯苯和亲水性N-乙烯基吡咯烷酮聚合成的固相填料可以很好地吸附脂质。EMR-L方法处理样品中有少量盐类物质析出，这是由于EMR-L方法的盐析步骤中含有大量NaCl和MgSO4。
2、基质效应
绝大部分喹诺酮类兽药在3 种基质和3 种前处理方法中基质效应不明显，仅有CIP和CIN在LLE法中出现了较强的基质抑制效应。因此，为了获得更好的定量效果，本研究使用空白基质匹配标准曲线来抵消基质效应。
3、方法学验证
以定量离子峰面积（y）为纵坐标，质量浓度（x，μg/L）为横坐标作定量工作曲线，得到猪组织中线性回归方程的相关系数r分别为0.991 4～0.999 9（EMR-L）、0.993 2～0.999 1（Oasis PRiME HLB）、0.990 2～1.000 0（LLE），表明经过3 种方法处理过的16 种喹诺酮类药物在1.0～100.0 μg/L范围内线性关系良好。以3 倍信噪比计算得到检出限分别为0.04～0.23（EMR-L）、0.08～0.41（Oasis PRiME HLB）、0.21～1.07 μg/kg（LLE），10 倍信噪比算得定量限分别为0.13～0.56（EMR-L）、0.27～1.36（Oasis PRiME HLB）、0.70～3.57 μg/kg（LLE）。
4、Q-TOF/MS检测结果
EMR-L分别为85.67%、95.61%、98.99%，Oasis PRiMEHLB分别为96.12%、87.69%、86.58%，LLE分别为73.29%、83.17%、70.26%。2 种仪器的定量结果具有相似的趋势，由于Q-TOF/MS相对三重四极杆质谱灵敏度较低，其检测低限为1 μg/kg，但仍满足我国所规定的最大残留限量10～500 μg/kg。这体现了Q-TOF/MS在拥有精确定性靶向目标物优势之余，同样可以满足对3 种方法处理过的猪组织样品中喹诺酮类药物进行日常检测的需要。
5、实际样品检测结果
EMR-L、Oasis PRiME HLB、LLE和国标4 种方法的检测结果分别为（16.3±0.49）、（16.8±0.35）、（15.4±0.91） μg/kg和（16.6±0.27） μg/kg。EMR-L和Oasis PRiME HLB方法测定结果与国标相近，表明这2 种商业产品满足猪组织中喹诺酮类兽药残留的定性定量筛查。
结 论
本研究统一采用酸化乙腈作为提取溶剂沉淀蛋白促进离子化效率，分别比较了以EMR-L为代表的QuEChERS法、以Oasis PRiME HLB为代表的固相萃取法和使用正己烷去脂的LLE法，结合当前检测常用的两类质谱：三重四极杆质谱和以Q-TOF/MS为代表的高分辨质谱。从净化结果来看，EMR-L与Oasis PRiME HLB净化去脂效果均优于LLE法，但EMR-L基质提取物因盐析脱水步骤导致盐含量较高，重复进样后离子信号强度有一定的降低，对仪器的具体影响有待进一步研究。从方法验证来看，3 种方法的检出限、定量限及精密度满足残留分析要求。其中2 种商业产品基质效应不明显，猪组织中加标回收率均在70%～120%之间。从整体回收率看，EMR-L对于水分含量较高的猪肝、猪肾优于Oasis PRiMEHLB；相对地，脂含量较高的猪肉中Oasis PRiME HLB重复性优于EMR-L。LLE方法所测样品中不在70%～120%之间的比例约为12.5%。与现行国家标准及行业标准相比，EMR-L与Oasis PRiME HLB能够缩短操作时间、节省人力和时间成本。根据高分辨和低分辨质谱定性定量的不同，以及不同样品基质组成差异，选用上述2 种方法相结合的方式进行处理检测，可以很好地避免假阳性结果的发生。本研究系统性将不同前处理方法结合不同检测手段引入猪组织的喹诺酮类兽药残留分析中，多角度评价了前处理方法对样品基质以及质谱检测的适用性，为当今环境中的食品安全监管提供了参考。
