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结核分枝杆菌的细菌抗酸性染色法

放大字体  缩小字体 发布日期:2019-01-11
核心提示:结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。
   结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。
 
  1、材料
 
  (1)结核病人痰
 
  (2)抗酸染色液
 
  (3)玻片、片夹、滤纸片、竹签、空平皿、污物盆。
 
  2、方法
 
  (1)取洁净的竹签沾取痰中血丝或脓性痰,在清洁无油脂玻片上涂开。涂抹区约拇指盖大。用过的竹签放到空平皿内待高压灭菌。
 
  (2)涂片自然干燥后,用片夹挟住玻片一端,通过火焰固定。
 
  (3)涂抹面用滤纸片盖上,然后往滤纸片上滴加石炭酸复红染液,使滤纸片完全被染液浸湿,持玻片在小火上加温片刻然后离开火焰,此时可见到玻片上冒出蒸气。待蒸气消失后再加温,如此反复3~4次,约5min,加温时随时添加染液勿使纸片干涸。
 
  (4)玻片冷却后,用接种环挑去滤纸扔到污物盆内,流水冲洗玻片。
 
  (5)滴加3%盐酸酒精脱色,至涂抹均匀部位基本没有红色再脱下为止,水洗。
 
  (6)滴加吕氏美蓝染液30sec,水洗。
 
  (7)吸干、镜检。
 
  3、溶液配制
 
  萋-尼(Zichl-Neelsen)抗酸染色液
 
  (1)石炭酸复红液:硷性复红4g,溶于95%酒精100ml,作成饱和溶液,再取该饱和液10ml与5%石炭酸溶液90ml混匀即成。
 
  (2)3%盐酸酒精液。
 
  浓盐酸3ml加入95%酒精97ml中即成。
 
  (3)吕(Loeffer)氏美蓝染色液
 
  美蓝2g,溶于95%酒精100ml中,作成饱和液。再取该饱和液30ml与0.01%氢氧化钾水溶液100ml混合均匀即可。
 
 
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