磷酸盐缓冲液是使用最为广泛的一种缓冲剂，由于它有二级解离，所以缓冲的pH值范围很广，可配置各种pH值的酸性、碱性和中性缓冲液：
配制酸性缓冲液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范围在1~5；
碱性缓冲液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范围在9~12；
中性缓冲液则用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在5.5~8.5。
磷酸盐缓冲液优点
易配成各种浓度
适用pH范围宽
pH受温度影响小
稀释后pH变化小
磷酸盐缓冲液缺点
易与常见的钙离子、镁离子及重金属离子缔合成沉淀
会抑制某些生物化学过程
Tris缓冲液
Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂，其本身为弱碱，常用有效pH在“中性”范围，Tris-HCl缓冲液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸盐缓冲液：pH＝5.0～9.0。
Tris-HCl缓冲液优点
碱性较强，可以只用这一种缓冲液配置由酸到碱的范围pH缓冲液；
对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
Tris-HCl缓冲液缺点
pH受浓度影响较大，稀释10倍，pH变化大于0.1
温度效应大，如4℃时pH=8.4，37℃时pH=7.4
易吸收空气中的二氧化碳
对某些pH电极有一定干扰作用，要使用与Tris溶液具有兼容性的电极
除了Tris-HCl之外，tris还有多种衍生缓冲液：
TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl，常用于清洗免疫染色的组织或Western Blotting中的蛋白印迹膜等；
TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20，做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液；
TE=Tris-HCl+EDTA，对DNA的碱基有保护性，常被用于DNA的稳定和储存；
TAE=Tris base+乙酸+EDTA，是大片段DNA短时间电泳时广泛使用的缓冲系统；
TBE=Trisbase+硼酸+EDTA，适用于长时间DNA电泳，对较小片段分离效果较好。
甘氨酸缓冲液
甘氨酸缓冲液pH范围较宽，使用范围较广，可用pH2.0~11.0，最常用体系和pH范围如下图所示：
氨基酸缓冲液优点：
为细胞组份和各种提取液提供更接近的天然环境。
氨基酸缓冲液缺点：
与磷酸盐缓冲体系相似，也会干扰某些生物化学反应过程，如代谢过程等；并且试剂价格较高。
HEPES缓冲溶液
HEPES是一种非离子两性缓冲液，其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力，常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。
HEPES缓冲液优点：
在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的pH值，并对细胞无毒性作用。
HEPES缓冲液缺点：
在高浓度时对一些细胞可能有毒，与其他缓冲剂相比价格略贵。
选择缓冲液的一般原则
重中之重，先确定你的体系所需要的pH值；
选择缓冲体系，其解离常数pKa值应该在设定的pH上下一个pH值单位内，因为缓冲液的pKa变化超过一个pH单位时，其缓冲能力就会明显下降；
缓冲体系不应影响蛋白质的活性或者DNA的稳定性，并避免其他离子的干扰；
最后，还要考虑温度的影响：温度不仅对缓冲液有影响，对细胞也有影响，大多数动物细胞在37℃的生理状况下pH为7.0~7.5，而在温度下降到0℃时可达到8.0。
