随着现代社会的快速发展和生活节奏的加快，人们的工作、学习压力越来越大，疲劳造成的身体不适和工作效率减退困扰着人们。随着对抗疲劳研究的逐步深入，许多有效的抗疲劳产品被发现，包括动植物蛋白、动植物蛋白肽和乳源性蛋白肽等。
松仁是红松属植物种子成熟去皮后得到的果仁，含有丰富的蛋白质、氨基酸、不饱和脂肪酸、矿物质、维生素等，具有较高的营养价值。目前，松仁的开发只局限于压榨松仁油，对其副产物松仁蛋白的开发较少，因此有必要对松仁蛋白进行深入探究。近年来，关于松仁蛋白活性肽的研究主要集中在其抗氧化活性、抗肿瘤活性、血管紧张素转化酶抑制活性等方面，但对松仁蛋白肽的抗疲劳功能还鲜有研究；因此对松仁蛋白进行深度开发具有重要的意义。来自哈尔滨工业大学化工与化学学院的郑元元、井晶、王振宇*、彭方帅是以红松松仁蛋白粉为原料，利用胃蛋白酶和胰蛋白酶两步酶解，再经超滤、离子交换树脂及凝胶过滤制备出松仁蛋白肽，并对其体外抗氧化活性和体内抗疲劳功能进行鉴定，为红松松仁资源的深度开发和研究提供理论参考。
1. 超滤各组分抗氧化活性分析
P1组分的半抑制浓度（IC50）低于其他组分，且极显着低于粗酶解物（P＜0.01），抗氧化活性最强，因此，选择P1组分进行下一步纯化。
2. SP Sephadex C-25分离结果
P1组分经SPSephadex C-25阳离子树脂分离后得到4个组分，分别记为PA、PB、PC、PD。
PD组分羟自由基和DPPH自由基的IC50低于其他组分，即清除能力均高于其他组分，即当NaCl浓度为0.10 mol/L时，洗脱组分的抗氧化活性最强。因此，选择PD组分进行下一步纯化。
3. Sephadex G-25分离结果
PD组分经Sephadex G-25分离后得到3 个组分，分别记为PDI、PDII、PDIII。
PDII组分的羟自由基和DPPH自由基IC50低于其他组分，即清除能力最强，与粗酶解物相比具有极显着差异（P＜0.01），因此，选择PDII组分进行后续研究。
4. 松仁蛋白多肽分子质量分布分析
利用GPC进行分子质量分布曲线的绘制，标准分子质量（mp/Da）对数与保留体积（Vp/mL）的线性关系为：lgmp＝12.9800－2.6735Vp＋0.2944Vp2－0.0120Vp3，r2＝0.999548。数均分子质量（mn）为693 Da，重均分子质量（mw）为878 Da，分子质量分布范围主要为500～1100 Da。
5. 体内抗疲劳能力测定结果
与空白组相比，松仁蛋白肽低、中、高剂量组和阳性组游泳时间均有所延长，低剂量组与空白组相比具有显着差异（P＜0.05），中、高剂量组以及阳性组与空白组相比具有极显着差异（P＜0.01）。高剂量组比阳性组小鼠游泳时间延长率增加了17.02%，表明PDII能起到延长小鼠的运动时间、提高其运动耐力的作用。
小鼠在剧烈运动后，松仁蛋白肽高剂量组的肝脏指数、脾脏指数及胸腺指数与空白组相比都有所增加，但无显着性差异，说明松仁蛋白肽在一定程度上可以缓解小鼠的疲劳症状。
与空白组相比，松仁蛋白肽各剂量组血糖浓度和肝糖原含量显着提高，中、高剂量组小鼠血糖浓度分别为空白组的1.70倍和2.04倍，差异显着（P＜0.05，P＜0.01）；中、高剂量组小鼠肝糖原含量分别为空白组的2.11 倍和2.20倍，差异极显着（P＜0.01）。结果表明，PDII可以提高小鼠体内肝糖原的储备能力，进而维持小鼠运动时的血糖浓度，延缓疲劳。
与空白组相比，中、高剂量松仁蛋白肽极显着降低血清尿素氮、丙二醛和乳酸浓度（P＜0.01），具有较强的抗疲劳能力，表明PDII具有降低体内血清尿素氮、丙二醛和乳酸浓度的效果，可以起到延缓疲劳的作用。
结 论
PDII的分子质量分布范围为500～1100 Da，该组分具有较强的抗氧化作用，不同剂量的PDII均能维持血糖水平、提高肝糖原的储糖能力，降低血清尿素氮、丙二醛、血乳酸的浓度，与空白组相比差异极显着（P＜0.01），说明从红松松仁蛋白分离出的PDII既具有体外抗氧化活性，又具有体内抗疲劳作用。
