western blotting基本原理
与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。
ELISA基本原理
酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。
western blotting操作与设备:需要先电泳后转膜,然后免疫结合,虽然操作复杂但不需要很高级的仪器设备
ELISA操作与设备
没有这么复杂的操作,只是需要酶标仪这样实验室常用的仪器
western blotting定性定量检测
偏向于定性的检测,定量也只能是通过比较的半定量,误差可能很大
ELISA定性定量检测
既可以定性也能非常精确的定量