黄酮类化合物是中药的主要成分之一，其抗肿瘤作用已被广泛研究。黄酮类化合物的主要抗肿瘤机制可能包括抗氧化和抗自由基作用、诱导肿瘤细胞凋亡以及对细胞周期的影响。木犀草素是天然资源中的一种活性类黄酮化合物，据报道具有多种生物学活性和治疗作用，包括抑制癌细胞的增殖和诱导细胞凋亡。研究表明：木犀草素具有良好的抗肿瘤作用，因而可能具有抑制癌细胞增殖、诱导癌细胞凋亡、自噬、细胞周期停滞、抑制肿瘤血管生成和逆转肿瘤多药耐药性等多种功能。木犀草素暴露于人结肠癌细胞和异种移植物的干扰研究表明：木犀草素对人结肠癌具有潜在的化学预防和化疗作用。此外，Tsai等人观察到木犀草素可以靶向癌症干细胞并降低癌细胞的侵袭性，表明其具有抗血管生成和抗转移剂的作用。实验还表明，木犀草素对骨肉瘤和黑色素瘤细胞具有一定的促凋亡作用。对木犀草素的多项研究表明，木犀草素不仅具有良好的抗肿瘤作用，而且通常对正常细胞无毒，这表明了其潜在的临床价值。然而，关于木犀草素在EC中潜在的保护机制的研究很少。该研究组前期研究确定了木犀草素对EC体外抗肿瘤作用的原因之一是通过调节细胞凋亡，从而凋亡细胞的百分比随木犀草素浓度的增加而增加。本研究旨在通过膜联蛋白V-FITC / PI染色评估浓度增加对Eca109细胞凋亡的影响，以验证木犀草素对Eca109细胞凋亡的影响，并研究其对细胞凋亡影响的可能机制。这可以为木犀草素的进一步研究和临床应用提供理论依据。
来自东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室、营养与食品卫生学系的Shaokang Wang、Lingmeng Fu、Yi Wu和Guiju Sun?等人将细胞分别暴露于不同浓度的木犀草素（0、40、80、120、160、200、240 μM）24、48和72 小时。用MTT法检测木犀草素对Eca109细胞增殖的影响。然后用木犀草素（0、40、160、240 μM）处理Eca109细胞24 小时。使用流式细胞仪（FCM）分析木犀草素对细胞周期进程和凋亡的影响。分别通过实时荧光定量PCR和Western blot分析caspase 9和caspase 3的mRNA以及蛋白的表达。结果表明，木犀草素可以在所有浓度下以时间依赖性方式抑制Eca109细胞的增殖，并且其相对抑制率与木犀草素浓度呈倒U型联系。此外，在用木犀草素处理后，细胞周期被阻滞在S期。凋亡分析表明，木犀草素可以诱导3 个浓度组的Eca109细胞凋亡，并随木犀草素浓度的增加呈现出先促进后抑制的趋势。木犀草素对caspase 9和caspase 3 mRNA和蛋白表达的影响首先表现为促进，然后被抑制。因此，木犀草素可能通过诱导涉及caspase 3、caspase 9 mRNA和蛋白表达的Eca109细胞凋亡来促进细胞凋亡。该研究为木犀草素的进一步研究和临床应用提供了理论依据。但是尚未阐明其具体机制，因此还需要进一步研究诱导凋亡的其他激活途径。
图1所示。药物治疗对Eca109细胞存活率的影响。(A)药物治疗抑制Eca109细胞生长。(B)木犀草素在不同时期抑制Eca109细胞的生长。
结 论
总之，在本研究中表明，木犀草素可能通过涉及在mRNA和蛋白质水平上调节caspase 3和caspase 9表达的机制来促进Eca109细胞凋亡。但是具体机制还有待阐明，其他诱导细胞凋亡的激活途径应进一步研究。该研究的局限性在于仅在一种人EC细胞系上研究了木犀草素的作用和机制。在未来的研究中，将测试多种细胞系以阐明木犀草素对EC的整体作用。
