传统发酵食品一般采用纯手工酿造工艺，为提高生产效率，很多企业对传统发酵食品的生产工艺进行了机械化改进。镇江香醋实现了微机集散控制系统制酒醪，实现了大罐发酵，对糯米粉碎蒸煮实现了机械化和连续化，对蒸煮、液化、糖化、冷却、发酵各个环节的温度时间实施自动控制，改变了传统酒醪生产随季节变化易产生的不稳定性，用冷却设备调节室温和发酵温度，实现了酒醪常年生产质量稳定。
由于浙江玫瑰醋独特的生产工艺，搅拌方式对其品质会有很大的影响。不同的搅拌方式以及搅拌频率对发酵过程会有不同的影响。浙江工商大学食品与生物工程学院的方冠宇、穆晓静和蒋予箭*设计了回流搅拌发酵罐、气动搅拌发酵罐和机械搅拌发酵罐，对浙江玫瑰醋冲缸放水后，进行机械化酿造，并对发酵结束后浙江玫瑰醋的理化指标、有机酸、氨基酸、挥发性成分及感官指标进行测定分析，得出不同机械化酿造工艺对浙江玫瑰醋理化指标和风味的影响，为浙江玫瑰醋实现机械化生产提供理论支持。
发酵结束浙江玫瑰醋得率分析
不同发酵罐的搅拌方式和搅拌频率对浙江玫瑰醋发酵过程有显着影响，为探究不同发酵罐以及不同搅拌频率对浙江玫瑰醋得率的影响，将发酵结束的玫瑰醋换算成4 g/L的成品醋，计算浙江玫瑰醋的得率。结果显示，2-2和3-2组玫瑰醋的得率高于传统玫瑰醋，说明用气动搅拌发酵罐和机械搅拌发酵罐，搅拌频率为5d 1 次生产浙江玫瑰醋可以提高浙江玫瑰醋的得率。机械搅拌发酵罐搅拌频率为7 d 1 次生产玫瑰醋的得率与传统玫瑰醋相近。采用回流搅拌发酵罐生产浙江玫瑰醋其得率都显着低于传统玫瑰醋，因此不适宜用回流发酵罐生产浙江玫瑰醋。
在乙醇发酵阶段，以较高频率搅拌可以使发酵液通入适量氧气、排出二氧化碳和生化作用产生的热量，并且使物料混匀，有利于酵母菌的增殖。但乙醇发酵过快，乙醇体积分数快速升高，会对酵母产生抑制，而淀粉转化为糖却在继续进行，导致玫瑰醋残余的还原糖较高，最终得率较低；搅拌频率过快，会对醋酸菌菌膜产生持续破坏，并且乙醇体积分数过高也会对醋酸菌产生抑制，导致醋的酸度很难上升，容易引起醋的腐败。搅拌频率最低，酵母菌的增殖速度最慢，乙醇发酵速度较慢，以至于在有较多还原糖剩余时，由于酸度上升酵母菌生长受到抑制，停止了乙醇发酵，也会降低玫瑰醋最终得率。
玫瑰醋有机酸含量分析
在各组玫瑰醋发酵完成之后，利用高效液相色谱对各组玫瑰醋样品中有机酸含量进行测定。并用HCA、PCA等方法对玫瑰醋中有机酸含量进行分析，比较不同发酵罐以及搅拌频率对玫瑰醋样品中有机酸含量的影响，以传统玫瑰醋为对照。
结果显示，9 种特征性有机酸在玫瑰醋样品里都有检出，用回流搅拌法生产玫瑰醋的有机酸含量低于其他组玫瑰醋样品。乙酸和乳酸在所有玫瑰醋样品中所占比例最大，占特征性总酸的90%左右。其他7 种有机酸（草酸、酒石酸、苹果酸、α-酮戊二酸、琥珀酸、焦谷氨酸、丙酮酸）含量较低，这些有机酸大部分是三羧酸循环途径的中间代谢物，在生成的同时也被作为其他代谢途径的前体进入更为复杂的代谢途径，所以其在醋酸发酵过程中不会有大量积累，但它们对食醋的滋味和风味起重要的作用。
结果显示，各醋样的非挥发性酸含量差异比较显着。用机械搅拌法生产的玫瑰醋的非挥发性酸含量显着高于其他醋样。3-3醋样中的非挥发性酸质量浓度最高，高达25.59 g/L，说明用机械搅拌法生产玫瑰醋有助于非挥发性酸的积累。用回流搅拌法生产的玫瑰醋的乳酸含量显着高于其他醋样。气动搅拌法生产的玫瑰醋的非挥发酸含量与传统方法生产的玫瑰醋非挥发酸含量相当。
由3 种发酵罐搅拌效果图可以看出，利用发酵罐以及传统手工对发酵液进行搅拌后，发酵液中溶氧量以及发酵罐氧气体积分数均会大幅上升，但搅拌后，两者均会快速下降，在120 min后维持动态平衡。说明搅拌频率对玫瑰醋中的有机酸影响较小。这与浙江玫瑰醋是静态表面发酵的情况相符。回流搅拌发酵罐在搅拌后发酵罐氧气含量显着低于其他组，发酵液温度显着高于其他组。而低氧气浓度和高温都有利于乳酸菌的生长，因此回流搅拌发酵罐中的乳酸含量显着高于其他组。气动搅拌发酵罐的形状与传统缸一致，因此搅拌后发酵液中的溶氧量、发酵罐内其他氧气含量、发酵液温度无显着差异，两者有机酸含量较相似。
由图5可以看出，不同发酵罐发酵对玫瑰醋中有机酸含量影响较大。HCA将醋样分为4 大类，由PCA结果可以看出，回流法发酵罐发酵的玫瑰醋乳酸含量比较突出，气动搅拌发酵罐和传统方法生产的玫瑰醋呈味有机酸为琥珀酸，机械搅拌发酵罐生产的玫瑰醋呈味有机酸主要为α-酮戊二酸、丙酮酸、苹果酸，以上结果说明搅拌方法对玫瑰醋中的有机酸含量影响较大，搅拌频率对有机酸含量基本无影响。
玫瑰醋中挥发性成分分析
用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱对机械化生产醋样的挥发性成分进行测定，以传统酿造玫瑰醋作对照，共检测出67 种挥发性成分，结果显示，其中醇类物质10 种、酸类物质10 种、酯类物质29 种、醛类物质4 种、酚类物质6 种、酮类物质6 种。
在所有玫瑰醋样品中，含量较高的醇类物质为乙醇、苯乙醇、3-甲基正丁醇。采用机械搅拌法生产的玫瑰醋其醇类物质含量要高于其他组。苯乙醇在玫瑰醋样品中含量很高，占醇类物质总含量的60.00%左右，苯乙醇具有清甜的玫瑰花香可以赋予玫瑰醋良好的香味。
在玫瑰醋样品中检出含量较高的酸类物质（除乙酸）为3-甲基丁酸、辛酸、癸酸。但在回流法酿造的玫瑰醋中未检出3-甲基丁酸和癸酸。酯类物质在玫瑰醋中含量很高，玫瑰醋中主要的酯类物质为乙酸乙酯、2-苯乙酸乙酯、乙酸异戊酯。机械搅拌法生产的玫瑰醋乙酸乙酯含量显着高于其他各组样品。用回流搅拌法生产的玫瑰醋酯类物质含量显着低于其他组。用气动搅拌法生产的玫瑰醋其酯类物质含量与传统方法生产玫瑰醋相当。
玫瑰醋中检测出的醛类、酚类和酮类物质的种类很少。各组玫瑰醋醛类和酚类物质含量相当。但用气动搅拌法生产的玫瑰醋的酮类物质显着低于其他各组。玫瑰醋中醛类物质含量最高的是苯甲醛，其具有甜味、果味、坚果和焦糖气味，可以赋予醋样品良好的香气。发酵结束玫瑰醋中挥发性成分含量结果显示，酚类物质含量是所有香气成分中最低的，但由于它们的气味阈值低，它们的味道是食醋特有的香气。
用回流搅拌发酵罐生产的玫瑰醋酯类、酸类、醛类挥发性成分显着低于其他玫瑰醋样品，品质较差。机械搅拌发酵罐搅拌强度很大，对物料搅拌较为充分，有利于发酵液中的生化反应，生产的玫瑰醋中酯类物质含量显着高于其他玫瑰醋样品，酯类物质具有花香和果香味，可以赋予玫瑰醋良好的香气。气动搅拌发酵罐形状及搅拌效果与传统手工酿造相似，因此其挥发性成分的组成与传统玫瑰醋相似，其品质与传统玫瑰醋接近。
对各醋样的挥发性成分（包括挥发性有机酸）含量进行HCA和PCA，结果见图7。可以看出，搅拌频率对玫瑰醋挥发性成分含量影响不大，但搅拌方法对挥发性成分的影响较大。HCA将玫瑰醋样品分为3大类：Group1：以不同频率搅拌的回流搅拌法生产的玫瑰醋；Group 2：以不同频率搅拌的机械搅拌法生产的玫瑰醋；Group 3：以不同频率搅拌的气动搅拌法生产的玫瑰醋和传统方法生产的玫瑰醋。回流搅拌法生产的玫瑰醋与机械搅拌、气动搅拌和传统玫瑰醋有较大差异。传统方法生产的玫瑰醋与气动搅拌生产的玫瑰醋聚为一类，说明气动搅拌法酿造的玫瑰醋与传统方法酿造的玫瑰醋的挥发性成分构成比较接近。其中2-2与传统方法酿造的玫瑰醋单独聚为一个小类，说明用气动搅拌并且搅拌频率为5 d 1 次生产的玫瑰醋的挥发性成分构成与传统方法酿造的玫瑰醋最接近。
由图7B可以看出，各类玫瑰醋的呈味物质有所差异，由回流搅拌法生产的玫瑰醋分布很集中，处于第4象限。传统方法生产的玫瑰醋与气动搅拌法生产的玫瑰醋比较靠近可以分为一类，说明以气动搅拌法对玫瑰醋进行搅拌时，其搅拌强度和搅拌后的溶氧量与传统方法对玫瑰醋进行搅拌相似。PCA的结果与HCA结果一致。由图7可以看出，Group 1的呈味物质主要有辛酸、苯乙酸乙酯、2-乙基丁酸乙酯、十二烷酸、2-苯乙酸乙酯等；Group 2的呈味物质主要有辛酸乙酯、壬酸乙酯、丁二酸二乙酯、2-甲基丙酸乙酯等；Group 3的呈味物质主要有糠醛、癸酸乙酯、己酸乙酯、苯甲醛等。
感官评定
由图8可以看出，由气动搅拌发酵罐生产的浙江玫瑰醋与传统玫瑰醋感官比较相近。各感官指标在达到最佳时得分最高，因此各组玫瑰醋在雷达图上围成的面积可以定量评价醋样的感官得分，分别为：1-1：204.34；1-2：226.25；1-3：209.89；2-1：230.71；2-2：270.28；2-3：214.89；3-1：208.87；3-2：240.28；3-3：215.39；传统：256.12。
由于气动搅拌发酵罐的形状与搅拌效果与传统玫瑰醋相似，气动搅拌发酵罐生产的玫瑰醋在有机酸、挥发性成分组成与传统玫瑰醋最接近，因此其感官评定结果也与传统玫瑰醋接近。回流搅拌发酵罐由于设计的不合理性，导致散热和气体交换受阻，因此玫瑰醋的感官评定结果较差。由结果可以看出，只有2-2玫瑰醋的感官得分高于传统玫瑰醋。因此用气动搅拌发酵罐，并且搅拌频率为5 d 1 次的生产方式可以生产较高质量的玫瑰醋。
结 论
用气动搅拌发酵罐和机械搅拌发酵罐，搅拌频率为5 d 1 次的酿造方式，可以将浙江玫瑰醋得率从传统的7.84 kg分别提高到8.25 kg和8.13kg；用回流搅拌发酵罐生产的玫瑰醋乳酸含量较高，机械搅拌发酵罐可以提高玫瑰醋中非挥发有机酸酸含量，对有机酸含量进行PCA和HCA，发现不同发酵罐对浙江玫瑰醋有机酸组成有较大影响，搅拌频率对有机酸影响不大；随着搅拌频率的增加可以增加玫瑰醋中氨基酸含量；用回流搅拌发酵罐生产的浙江玫瑰醋挥发性成分显着低于其他玫瑰醋，对挥发性成分含量进行PCA和HCA，发现不同发酵罐对玫瑰醋中挥发性成分影响较大，搅拌频率影响较小。采用气动搅拌发酵罐并且搅拌频率为5 d 1 次的生产方式生产的玫瑰醋与传统玫瑰醋品质最接近。本研究为浙江玫瑰醋实现机械化生产提供了理论支持。
