每周排便次数低于3 次则被视为处于便秘状态，当次数低于1 次则视为严重便秘状态，是一种威胁人体健康，特别是对结肠健康具有较大影响的复杂症状。乳酸菌对便秘预防效果在前期研究中证实，首粒黑便排便时间、血清胃动素（MTL）、胃泌素（Gas）、内皮素（ET）、生长抑素（SS）、乙酰胆碱酯酶（AChE）、P物质（SP）、血管活性肠肽（VIP）的水平都可作为评价乳酸菌便秘预防作用的指标。通过分子生物学实验检测结肠组织中相关mRNA表达能更确切地证实乳酸菌的生理功效。
来自重庆第二师范学院生物与化学工程系的易若琨、骞宇、王强等人以LP-YS1为对象，使用常用的保加利亚乳杆菌（LB）为对照菌株，首先通过体外实验比较LP-YS1和LB人工胃液和胆盐耐受性，初步了解LP-YS1对胃肠的生理活性作用，再进一步通过动物实验研究LP-YS1对便秘的活性作用，以期为进一步开发LP-YS1提供理论依据。
01LP-YS1耐受人工胃液和胆盐的能力
LP-YS1在pH 3.0人工胃液和胆盐中耐受能力均高于普通保加利亚乳杆菌，且LP-YS1在pH 3.0人工胃液中耐受能力是LB的约2.5 倍，而对不同含量胆盐的耐受能力是LB的约10 倍。为研究乳酸菌的潜在益生菌作用，建立体外虚拟模型，检测乳酸菌的抗胃酸能力和胆酸盐耐受能力是重要的检测手段。本研究中LP-YS1具有比LB更强的抗人工胃酸和胆酸盐耐受能力，具有良好的生理活性。
02LP-YS1对便秘小鼠体质量的影响
前2 周中各组小鼠的体质量都呈现出正常的增长状态，各组之间没有明显差异。活性炭诱导便秘后，没有经过活性炭处理的正常组小鼠体质量继续增长，其余各组小鼠体质量均出现下降，便秘对照组小鼠的体质量下降最多，高浓度LP-YS1灌胃小鼠的体质量最接近正常组小鼠。活性炭诱导便秘的小鼠体质量低于正常小鼠，另外，大鼠经盐酸洛派叮胺诱导便秘后体质量也出现下降，可见动物便秘可导致体质量增加缓慢。结果显示LP-YS1对便秘造成的小鼠体质量下降具有较好的抑制效果。
03LP-YS1对小鼠排便的影响
第1～14 天各组小鼠的粪便质量、颗粒数和含水量没有显着差异（P＞0.05）；活性炭诱导便秘后，在第15～17 天正常组小鼠的粪便质量、颗粒数和含水量最高，便秘对照组最低，LB和LP-YS1可以显着缓解便秘造成的粪便质量、颗粒数和含水量下降（P＜0.05），高浓度的LP-YS1使便秘小鼠的粪便质量、颗粒数和含水量最接近正常组，显着高于同浓度LB灌胃的小鼠（P＜0.05）。乳酸菌LP-YS1也可通过增加便秘小鼠的排便质量、排便颗粒数、水分含量，起到缓解便秘的作用。
04LP-YS1对活性炭推进率的影响
活性炭诱导便秘后，乳酸菌可以增进活性炭在小肠中的推进距离，高浓度的LP-YS1推进距离最大，由此产生的活性炭推进率最高，显着高于低浓度LP-YS1和LB灌胃小鼠（P＜0.05）。LP-YS1使活性炭在小鼠小肠中推进长度和推进率均高于LB，且高浓度LP-YS1的效果更为明显。
05LP-YS1对首粒黑便排出时间的影响
正常组小鼠表现出最短的首粒黑便排出时间（88±7） min，便秘对照组的时间最长，达到（231±33） min，LB、低浓度LP-YS1和高浓度LP-YS1灌胃小鼠的首粒黑便排出时间分别为（175±27）、（163±22） min和（132±16） min。相对于便秘对照组小鼠LP-YS1可以显着降低首粒黑便排出时间（P＜0.05），具有良好的便秘缓解作用。
06LP-YS1对小鼠血清MTL、Gas、ET、SS、AChE、SP和VIP水平的影响
正常组小鼠血清的MTL、Gas、ET、AChE、SP、VIP含量最高，SS含量最低，便秘对照组小鼠呈现出相反的趋势，LB和LP-YS1可以使这些血清指数接近正常组水平，而高浓度LP-YS1灌胃小鼠的血清水平最为接近正常组。结果体现出LP-YS1可以使这些血清水平尽量保持正常，缓解便秘。
07LP-YS1对小鼠小肠c-Kit和SCF基因mRNA表达的影响
相对于便秘对照组LP-YS1可以显着上调小鼠小肠中的c-Kit和SCF基因mRNA表达（P＜0.05），且高浓度的LP-YS1使c-Kit和SCF基因表达更为接近正常组小鼠。便秘小鼠结肠组织中的ICC含量较少，结肠组织中的c-Kit表达水平也下降。便秘造成小鼠小肠中c-Kit和SCF表达下降，LP-YS1可以有效上调c-Kit和SCF的表达（P＜0.05），将起到增加便秘小鼠肠道中ICC的作用，从而抑制便秘。
08LP-YS1对小鼠小肠TRPV1、GDNF和NOS基因mRNA表达的影响
正常组小鼠具有最高的GDNF表达和最低的TRPV1、NOS表达，而便秘对照组小鼠的GDNF相对表达量最低，TRPV1、NOS相对表达量最高，相对于便秘对照组LB和LP-YS1均可以上调GDNF表达和下调TRPV1、NOS表达，高浓度的LP-YS1表现出更强的作用。通过调控TRPV1、GDNF和NOS表达，使肠道中的这些表达恢复正常，能缓解便秘，是乳酸菌起到便秘抑制作用的机制之一。
结 论
藏区牦牛酸乳分离的LP-YS1具有良好的胃酸和胆盐耐受能力，可以有效缓解便秘造成的小鼠体质量下降，粪便质量、颗粒数和含水量下降，同时提高活性炭在小肠中的推进率和缩短排出首粒黑便的时间。通过试剂盒对小鼠血清的检测也发现LP-YS1可以使便秘小鼠的MTL、ET、SS、Gas、AChE、SP、VIP含量提高和SS水平下降。RT-PCR实验进一步显示LP-YS1可以上调便秘小鼠c-Kit、SCF、GDNF基因的mRNA表达和下调基因TRPV1、NOS表达。通过这些实验结果证明LP-YS1可以有效地缓解便秘，且效果优于常用的LB。
