一、产品名称:品红亚硫酸钠琼脂
二、产品用途: 品红亚硫酸钠琼脂培养基用于水中大肠菌群的分离或确证试验。 (GB/T8538-2008和GB5750.12—2006)。三、产品原理:品红亚硫酸钠琼脂培养基 中乳糖发酵的细菌产生乙醛,在存在碱性品红的情况下乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落,快速发酵乳糖的细菌产生金属光泽,不发酵乳糖的细菌形成无色透明的菌落。蛋白胨、酵母膏粉、牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和矿物质;乳糖为可发酵的糖类;琼脂是培养基的凝固剂;磷酸氢二钾为缓冲剂;亚硫酸钠能将碱性品红还原,使其褪色,发酵乳糖的细菌产生乙醛,与亚硫酸钠和碱性品红生成红色菌落。
品红亚硫酸钠琼脂培养基 配方(每升):
蛋白胨 | 10g |
酵母膏粉 | 5g |
牛肉膏粉 | 5g |
乳糖 | 10g |
琼脂 | 15g |
磷酸氢二钾 | 3.5g |
无水亚硫酸钠 | 5g |
碱性品红 | 1g |
使用方法:1、 称取品红亚硫酸钠培养基54.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,115℃高压灭菌20min,冷至50℃左右,倾注无菌平皿,备用。2、 滤膜灭菌:将孔径为0.45μm的滤膜放入烧杯中,加入蒸馏水或去离子水,置于沸水浴中煮沸灭菌三次,每次15min。前两次煮沸后需更换水洗涤2—3次,以除去残留溶剂。3、 滤器灭菌:用点燃的酒精棉球,火焰灭菌。也可用121℃高压灭菌20min。4、 过滤水样:用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分,将粗糙面向上,贴放在已灭菌的滤床上,固定好滤器,将100mL水样(如水样含菌较多,可减少过滤水样量,或将水样稀释)注入滤器中,打开滤器阀门,负0.5大气压下抽滤。5、 培养:水样抽滤完后,再抽气约5S,关上滤器阀门,取下滤器,用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分,移放在品红亚硫酸钠培养基上,滤膜截留面向上,滤膜应与培养基完全贴紧,两者间不得留有气泡,然后将平皿倒置,放入36±1℃恒温箱内培养22—24h。6、 观察结果:挑出符合下列特征菌落进行革兰氏染色、镜检。紫红色,具有金属光泽的菌落。深红色,不带或略带金属光泽的菌落。淡红色,中心色较深的菌落。
品红亚硫酸钠琼脂培养基 质量控制: 本培养基倾注平皿待冷却后呈浅红色。质控菌株接种后。36±1℃培养22—24h, 观察结果如下表:
菌 名 | 菌 号 | 生长状况 | 菌落特征 |
大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | 良好 | 红色,有金属光泽 |
鼠伤寒沙门氏菌 | CMCC(B)50115 | 良好 | 无色至淡粉红色 |
金黄色葡萄球菌 | ATCC6538 | 不长或差 | —— |
规 格:250g
参考文献:1. GB/T 8538-2008 中华人民共和国国家标准 饮用天然矿泉水检验标准2. GB5750.12-2006 中华人民共和国国家标准 生活饮用水检验方法 微生物
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