来自西南大学食品科学学院的赵景芳、何银、唐杰和曾凡坤*等人以蜜桔为实验材料，从腐烂的柑橘上分离致病病原菌，研究槐糖脂对蜜桔采后青霉的抑制作用，并对蜜桔果实采后诱导抗病性的机理进行初步的探讨，以期为蜜橘果实采后青霉病的防治提供一定的理论依据。
1、病原菌的形态学鉴定
病原菌在PDA平板上菌落生长较快，呈现青绿色、粉粒状、较薄，有白色的边缘，菌落颜色随着培养时间的延长而逐步加深，有同心环。
2、回接实验结果
回接实验表明，该菌株能够引起蜜桔表面发生腐烂，果实在接种的48 h开始发病，发病初期果实变软，接种处呈现青绿色圆形病斑，最后至整个果实腐烂，此症状与田间蜜桔青霉病症状一致。将该菌株在PDA上分离、纯化并扩大培养，能够得到与所接种菌株培养形状相同的菌落。
3、病原菌rDNA-ITS序列分析
3.1 病原菌ITS序列电泳结果
以病原菌DNA作为模板，扩增出500 bp左右的DNA片段。
3.2 病原菌rDNA-ITS序列测定结果
病原菌株I T S测定结果表明，该片段长590 bp。将该核苷酸序列提交到GenBank核苷酸数据库（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast），通过BLAST程序对比分析得到结果：该病原菌与已知的意大利青霉（Penicillium italicum，HQ850905.1）rDNA-ITS区域同源性为99%，根据该病原菌的形态学特征和分子鉴定结果，说明此病原菌为柑橘意大利青霉。
4、不同质量浓度槐糖脂对青霉菌体外生长状况的影响
槐糖脂能抑制柑橘意大利青霉菌落直径的扩展，不同质量浓度槐糖脂实验组菌落水平在贮藏期间均显着低于对照组（P＜0.05）。当槐糖脂质量浓度为0.100 g/L时，青霉菌的生长被完全抑制，说明槐糖脂对青霉菌具有较好的抑制效果。
5、不同质量浓度槐糖脂接种处理对蜜桔青霉病的控制效果
同孔接种处理后，72 h时对照组发病率达100%，而槐糖脂处理组发病率较低，说明槐糖脂有效地延缓了蜜桔果实青霉病的发病；在108 h的贮藏期间，35 g/L槐糖脂实验组发病率始终处于较低的水平。同孔接种处理后，对照组蜜桔果实病斑直径迅速扩展，贮藏84 h，所有实验组均发病，经对比可知，在贮藏期间，槐糖脂质量浓度为35 g/L时对蜜桔病斑直径的抑制效果最好，因此选用质量浓度为35 g/L的槐糖脂对蜜桔采后青霉病的控制效果进行研究。贮藏96 h时，对照组病斑直径为2.89 cm，与35 g/L槐糖脂实验组（0.038 cm）相比差异显着（P＜0.05）。
6、接种处理对果实果皮酶活力的变化
6.1 接种处理对蜜桔果皮PPO和POD活力的影响
在接种处理后贮藏的5 d内，蜜桔果皮的PPO和POD活力总体呈先上升后下降的趋势。与对照组相比，槐糖脂实验组的PPO和POD活力明显增高，且在接种后贮藏的第3天，槐糖脂接种实验组POD、PPO活力分别约为对照组的2.90、1.96 倍。
6.2 接种处理对蜜桔果皮PAL活力的影响
在接种槐糖脂处理的5 d内，蜜桔果皮的PAL活力整体大致呈现先升高后降低的趋势，且PAL活力显着高于对照组。接种后贮藏的第3天，槐糖脂实验组的PAL达到峰值，约为对照组的1.7 倍（P＜0.05）。
7、浸泡处理对蜜桔果皮酶活力的影响
7.1 浸泡处理对蜜桔果皮PPO、POD活力的影响
在25 d的贮藏期内，经槐糖脂浸泡处理后的蜜桔，其POD和PPO活力整体呈现先增高后降低的趋势，且对照组的PPO活力在贮藏的25 d内一直比实验组低。在贮藏期内，对照组的PPO和POD处于较低的水平。在贮藏的第10天，槐糖脂实验组的POD、PPO活力约为对照组的1.84、2.72 倍。
7.2 浸泡处理对蜜桔果皮PAL活力的影响
在25 d的贮藏期内，经槐糖脂浸泡处理后的蜜桔PAL活力呈先增加后降低的趋势，且对照组PAL活力在25 d内一直比槐糖脂实验组低。在贮藏的第15天，槐糖脂实验组的PAL活力约为对照组的1.54 倍。
结 论
从自然发病的蜜橘果实上分离出一株致病真菌，通过形态学特征、rDNA-内转录间隔区（rDNA-ITS）分析以及致病性检测，发现该真菌为柑橘意大利青霉（Penicillium italicum）。离体实验发现，当槐糖脂质量浓度为0.1 g/L时，青霉的生长被完全抑制；在果实实验中，当槐糖脂质量浓度为35 g/L时，蜜桔果实的病斑直径最小，且发病率最低。采用质量浓度为35 g/L的槐糖脂对蜜桔果实进行接种和浸泡处理，均能有效提高蜜桔果实的抗病性，且蜜桔果皮的过氧化物酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶的活力得到了提高。该实验为蜜桔果实采后青霉病的防治提供了一定的理论依据。
