目前仅有上述关于青砖茶微生物的研究，且不同研究因取样、不同堆层等结果各有差异。因此，对青砖茶渥堆发酵中微生物的研究十分必要，尤其是不同堆层间在不同渥堆发酵时期的微生物，农业部华中都市农业重点实验室，华中农业大学园艺林学学院的张丹丹、王佳佳、黄友谊*等人以期为了解微生物形成青砖茶的品质提供理论支持。
1、青砖茶渥堆发酵中霉菌动态变化
渥堆发酵前期即一翻前，上层样中霉菌数量迅猛增加，渥堆发酵第8天时霉菌的数量上升至最大值，为1.62×108 CFU/g，是渥堆原料（8.26×106 CFU/g）的19.61 倍，且显着高于其他上层样以及中层样、下层样的霉菌数量（P＜0.05）。一翻前中层样、下层样的霉菌数量明显降低，均低于1.00×105 CFU/g；最低为中层样渥堆发酵第3天，为5.06×103 CFU/g，较原料显着降低了1 632.41 倍（P＜0.05）；混合样为上、中、下层均匀混合的茶样，其霉菌数量介于上层样与中、下层茶样之间。一翻后，上层样的霉菌数量相比翻堆前明显下降，中层样、下层样霉菌数量均增加。随着中后期渥堆的进行，不同堆层的霉菌数量上下波动。总体来说，青砖茶渥堆发酵前期，上层样霉菌数量增加显着（P＜0.05），达1.62×108 CFU/g，而中、下层霉菌数量急剧减少；渥堆发酵中后期，上层样中霉菌数量降低，不同堆层的霉菌数量变化不明显，在3.60×105～1.51×107 CFU/g间上下浮动。
2、青砖茶渥堆发酵中酵母动态变化
渥堆发酵一翻前，上层样酵母数量先增加后降低，第3天达到最大值4.42×107 CFU/g，是渥堆原料（3.46×105 CFU/g）的127.75 倍，且显着高于其他上层样以及中层样、下层样的酵母数量（P＜0.05）。中层样、下层样的酵母数量较原料有所降低，最低为中层样，其渥堆发酵第3天时仅为3.61×103 CFU/g，较原料降低了98.96%。在一翻后至二翻前，除渥堆发酵第12天的上层样中酵母数量略有增加，为1.71×106 CFU/g，其他时间上、中、下层的酵母数量均较低。
3、青砖茶渥堆发酵中细菌动态变化
渥堆发酵一翻前，上、中、下层样中细菌数量均随渥堆发酵的进行而不断下降，且中、下层样下降更明显，均低于1.00×106 CFU/g；其中中层样渥堆发酵第8天时降至最低，为1.98×105 CFU/g，较渥堆原料（2.81×107 CFU/g）降低了99.3%，并与渥堆原料差异显着（P＜0.05）。一翻后，上层样的细菌数量较翻堆前有所下降，而中层样、下层样却有所增加，且在渥堆发酵第12天时中、下层样的细菌数量高于上层样。渥堆发酵第16天时上层样的细菌数量增加，中层样、下层样的细菌数量下降。二翻后，不同堆层的细菌数量整体增高，上层样在渥堆发酵第20天时显着增加，达到最大值3.10×108 CFU/g，是渥堆原料的11.03 倍；中层样、下层样的细菌数量也在二翻后分别达到了最高点，但低于上层样中的数量。
4、青砖茶渥堆发酵中放线菌动态变化
渥堆发酵一翻前，上层样放线菌数量略有增加；中层样、下层样的放线菌数量下降明显，且在渥堆发酵前期保持较低浓度，均低于1.20×105 CFU/g；放线菌数量在下层样渥堆第8 天时达到最低值7.37×104 CFU/g，比渥堆原料（1.46×107 CFU/g）降低了99.5%，并与渥堆原料差异显着（P＜0.05）。一翻后，上层样的放线菌数量下降，中、下层样增加；在渥堆发酵中期放线菌数量整体下降。
5、青砖茶渥堆发酵中堆温、含水量、pH值变化
渥堆发酵第9、19天时堆温明显下降，其分别为一翻、二翻时，说明翻堆可明显降低堆温。在一翻前，随着渥堆发酵的进行堆温不断升高；渥堆发酵前3 d，堆温由29.67 ℃上升至63.33 ℃，且前3 d堆温间差异显着（P＜0.05），第8天时平均堆温高至68.17 ℃；其研究表明40、80 cm堆层处的温度高于20 cm处，5 cm处的温度相比最低。一翻后，整体堆温立马下降至与室温相近，随着渥堆发酵的再次进行，堆温先升高后降低，第13天时堆温达到渥堆中期的最高值54.17 ℃，后渥堆发酵温度逐渐下降。二翻后，渥堆发酵温度基本恒定，接近环境室温，保持在30.00 ℃左右。
6、青砖茶渥堆发酵中微生物生长与堆温、含水量、pH值的相关性
在整个青砖茶渥堆发酵过程中，细菌生长繁殖与放线菌生长繁殖、pH值之间呈极显着正相关（P＜0.01），与堆温呈极显着负相关（P＜0.01），与含水量无显着相关（P＞0.05）。放线菌本身属于细菌，因此与细菌相似，其生长繁殖与pH值呈极显着正相关（P＜0.01），与堆温呈显着性负相关（P＜0.05）。堆温与含水量呈极显着正相关（P＜0.01），与pH值呈极显着负相关（P＜0.01）；含水量与pH值呈极显着负相关（P＜0.01）。但霉菌、酵母生长繁殖均与堆温、含水量、pH值无显着相关性（P＞0.05）。
结 论
青砖茶渥堆发酵过程中，不同堆层间微生物数量差异大，尤其一翻前上层样与中、下层样微生物差异显着，上层样的酵母、霉菌数量分别增至最大，但中、下层样的各类微生物数量均降至最低。一翻后，不同堆层的各类微生物随着渥堆进行均在一定范围内上下波动。真菌数量在一翻前上层样相对高湿、高温的环境下达至最大，细菌、放线菌数量在渥堆后期较为干燥、相对较低的温度下达至最大，渥堆发酵茶叶中的温湿度会直接影响不同类微生物的数量。翻堆对青砖茶渥堆发酵相当重要，可一定程度控制霉菌数量，避免堆温过高烧坏茶叶，并使上、中、下层茶叶中的各类微生物均匀分配，达到生产上渥堆发酵均匀的目的。另外，实验也证明了分层取样对了解青砖茶渥堆发酵过程中的微生物变化十分必要。
