来自山西师范大学生命科学学院的高伟华、段江燕*和中国农业科学院农产品加工研究所的刘鹭、吕加平*等人利用高糖高脂联合链脲佐菌素（STZ）诱导小鼠患糖尿病，并对其进行乳酸菌菌液的灌胃，分析与血脂代谢相关指标水平的变化，旨在揭示乳酸菌对2型糖尿病小鼠糖脂代谢的干预作用。
1、菌株筛选结果
通过BSH活力分析可以看出，在6 株菌中D36号菌降胆固醇能力显着高于其他菌株，其次是SY13菌。乳酸菌在经过胃液、胆汁环境时，大部分会因为胃液的低pH值、消化酶及胆汁盐等因素被杀死，因此，在灌胃前筛选存活率较高的菌株以适应胃肠道环境很有必要。在pH 4.0时，D36、D18、SY13菌均有较高的存活率，随着pH值的降低菌株存活率明显下降，当pH值降低到2.0时，还保持一定耐酸优势的3 株菌分别是D6、D36和SY13菌；因此，综合3 个pH值梯度可以看出D36和SY13菌耐酸性较好。在质量分数0.3%胆盐条件下，37 ℃厌氧培养12 h后，除D6之外，其他5 株菌存活率都在30%以上，有较强的胆盐耐受能力。综合BSH活力、耐酸性、胆盐耐受性，筛选出D36菌和SY13菌作为灌胃小鼠菌株。
2、对高糖高脂小鼠体质量的影响
各组小鼠因是随机分组，初始体质量基本一致。经过14 周的喂养，小鼠体质量均有增加，但增长幅度不同。N组小鼠体质量增长幅度最大，增长率最高，M组增长幅度较N组明显降低，可能是因为长时间高糖高脂饲料的饲喂使小鼠出现一些病变，摄食量减少，而灌胃SY13菌与36号菌显着改善了小鼠的健康状况，体质量增长率较高，与N组之间无显着性差异（P＞0.05）。
3、对高糖高脂小鼠空腹血糖浓度的影响
高糖高脂饮食使小鼠空腹血糖浓度一直在升高，到第14周时，M组小鼠空腹血糖浓度（12.75 mmol/L）显着高于N组（2.62 mmol/L）（P＜0.05）。经过菌液的灌胃，小鼠空腹血糖浓度呈下降趋势，从第10周开始时得到明显抑制，到第14周时SY13菌组空腹血糖浓度下降到9.75 mmol/L，D36菌组下降到6.36 mmol/L，与M组相比差异显着（P＜0.05）。结果表明乳酸菌能明显降低2型糖尿病小鼠的空腹血糖浓度，对高血糖症有一定疗效。
4、对高糖高脂小鼠口服葡萄糖耐量的影响
M组小鼠空腹血糖浓度为12.17 mmol/L，显着高于N组小鼠空腹血糖浓度（7.95 mmol/L），显示高糖高脂饮食加速诱导动物患糖尿病的模型造模获得成功。各组小鼠在给予葡萄糖（2 g/kg mb）30 min后，血糖浓度均急剧升高并达到顶峰，然后随着时间延长血糖浓度下降，但M组仍处在较高的水平上。120 min后，N 组血糖浓度基本回到灌胃前的水平， 说明N 组小鼠口服葡萄糖耐量正常。而M组的血糖浓度（22.77 mmol/L）远高于0 min（12.17 mmol/L），说明M组小鼠已基本丧失了调节血糖的能力，而SY13菌组与D36菌组120 min后的血糖浓度只略高于0 min时，与M组相比有显着差异（P＜0.05），说明灌胃菌液可以有效减缓小鼠餐后血糖浓度升高，并改善其调控血糖的能力。
5、两株乳酸菌对高糖高脂小鼠糖尿病相关指标的影响
M组糖化血红蛋白相对含量（26.34±3.72）显着高于N组（13.56±3.48）（P＜0.05），在这种高血糖状态时，M组内毒素含量的升高（M组显着高于N组）使糖代谢发生紊乱，导致胰岛素抵抗的发生，使胰岛素含量异常升高（M组显着高于N组），加速了机体对储存糖原的消耗，使肝糖原含量显着下降（M组显着低于N组），从而进一步加重糖代谢的紊乱。但是相对M组，通过一段时间菌液的灌胃，SY13组糖化血红蛋白含量显着下降（P＜0.05），D36组含量下降不显着（P＞0.05），但肝糖原含量却明显增加（1.96 mg/g），高于M组（0.83 mg/g），说明两株菌液的灌胃在糖尿病相关生化指标上有一定改善作用，均在一定程度上降低了小鼠的血糖水平，缓解了小鼠糖代谢紊乱状况。
6、对高糖高脂小鼠血脂水平的影响
第6、10周和第14周时M组的TC、TG、HDL-C、LDL-C水平均高于N组，第10周时两组间差异最为显着（P＜0.05），TG水平除外，说明长期高糖高脂饮食导致了小鼠脂质代谢的紊乱，到第10周时极为严重。而灌胃SY13菌组与D36菌组，TC、LDL-C指标相较M组明显降低，在第14周时降低最显着（P＜0.05），HDL-C水平则在第14周时高于M组但差异不显着（P＞0.05）。结果表明，两株乳酸菌对2型糖尿病小鼠的血脂水平均有明显改善，且D36菌改善效果优于SY13菌。
7、对血清炎症因子的影响
第6、10周和第14周M组小鼠血清促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6质量浓度总体高于N组，且第6周时二者差异显着（P＜0.05），IL-1β除外，其在第14周时差异显着（P＜0.05）。M组抗炎因子IL-10质量浓度则在3 个时间点均低于N组。与M组相比较，灌胃SY13菌组与D36菌组的小鼠血清促炎因子TNF-α和IL-6质量浓度在第6周时有所下降，第10周时质量浓度异常升高，但到第14周时可以看出比第10周又有所下降，而抗炎因子IL-10的含量则从第6、10周到第14周3 个时间节点呈现一个逐渐上升的趋势，并且在第14周时两个菌液灌胃组IL-10质量浓度均显着高于M组（P＜0.05），说明灌胃菌液促进了机体对高脂血症引发的一系列炎症反应做出积极的抗炎反应。
8、对高糖高脂小鼠肝脏匀浆抗氧化活性的影响
相对N组，摄食高糖高脂饲料后，M组小鼠肝脏MDA水平显着上升，在第14周时二者差异显着（P＜0.05），GSH-Px和SOD活力则下降，在第10周时的差异最显着（P＜0.05）。第16周SY13菌组和D36菌组的CAT活力（第6、10周数据未显示）有所下降，但与N组差异不显着，表明长期高脂饲料的摄入加重了肝脏的负担，使肝脏组织发生了严重的氧化损伤。而菌液灌胃使小鼠肝脏的抗氧化活性均有不同程度提高，其中GSH-Px活力提高最为明显，且SY13菌优于D36菌，其在3 个时间节点上GSH-Px活力均高于M组；而SOD活力则从第6周时低于M组逐渐提高到14周时高于M组，但与M组之间差异不显着；SY13菌组与D36菌组CAT活力在第14周时显着高于M组（P＜0.05）。与M组相比，两个菌液灌胃组小鼠MDA水平均有不同程度降低，且在第14周时MDA水平降低最显着（P＜0.05）。结果表明，灌胃乳酸菌可以减轻2型糖尿病小鼠的肝脏过氧化，提高机体的抗氧化活性
9、小鼠胰腺组织病理学的变化
第6周时M组小鼠部分胰岛细胞变性，变性的胰岛细胞胞浆肿胀，胞浆内可见泡状结构。SY13菌组小鼠病变较轻，D36菌组局部胰岛细胞变性，变性细胞胞浆肿胀，红染颗粒状物质团块明显可见。第10周时M组小鼠病变加重，胞核偏位，变性的胰岛细胞增多，胞浆内泡状结构增加，SY13菌组小鼠出现病变，胞浆内可见泡状结构，D36菌组小鼠腺泡细胞空泡变性，红染颗粒状物质团块现象加重。到第14周时M组小鼠胰岛萎缩，数量减少，面积缩小，胰岛细胞排列紊乱，局灶性腺泡细胞空泡变性，胞浆内可见嗜酸性颗粒状物质的泡状结构。与M组相比，SY13菌组局灶性腺泡细胞空泡病变减轻，变性胰岛细胞数量减少，而D36菌组胰岛细胞排列整齐，细胞胞浆丰富均匀，腺泡细胞空泡变性消失，病变程度明显得到改善。上述结果表明，长期高糖高脂饮食严重损坏了小鼠胰腺组织，两种乳酸菌的灌胃能明显改善小鼠胰岛细胞病变情况，极大减轻腺泡细胞空泡变性程度。
10、两株乳酸菌对高糖高脂小鼠脂肪组织IL-10、Adipoq基因表达的影响
高糖高脂饮食处理使IL-10和Adipoq的表达有所降低，但与N组差异不显着。与M组相比，灌胃D36菌与SY13菌液显着提高了IL-10基因的表达水平（P＜0.05），这一结果与前述的炎症因子的影响一致，Adipoq基因表达变化则不显着。结果表明，菌液可能通过调节脂质代谢与炎症因子相关基因的表达，进而改善机体脂代谢紊乱。
结 论
筛选出干酪乳酸菌SY13和D36有较强的降胆固醇、耐酸和耐胆盐能力。与M组相比，通过一段时间菌液的灌胃，显着抑制了小鼠血糖水平和血清中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平的上升（P＜0.05），提高了高密度脂蛋白胆固醇水平和抗炎因子IL-10水平（P＜0.05），不同程度提高了肝脏谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力，显着降低了丙二醛含量（P＜0.05），改善了小鼠糖代谢紊乱状况，明显减轻了胰岛和腺泡细胞病变情况，脂肪组织中IL-10和Adipoq基因表达水平显着提高。结论：乳酸菌SY13和D36能够显着改善糖高脂饮食联合STZ诱导的小鼠糖脂代谢。四月者，送严寒而迎东君，历清明而过谷雨。金风和煦，万物复苏。百芳发而幽香逸，春鸟还而鸣声碎。
