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临床意义
肺吸虫病是由并殖吸虫引起的人兽共患病,常造成肺部损害,也有的造成皮下、腹部与中枢神经系统的损害,同时体内会产生特异性的抗体并获得一定免疫力,检测特异性肺吸虫抗体可作为肺吸虫感染的辅助诊断指标。
本试剂盒采用肺吸虫(P.westermanii,P.w)抗原作固相抗原检测人及动物血清中的特异性肺吸虫抗体。本试剂灵敏度高,特异性强,重复性好,操作方便快速,可分多次使用。
试剂组成
1.预包被板 | 48T/96T; | 6.样本稀释液(5号液) | 1支; | |
2.酶结合物(1号液) | 1支; | 7. 终止液(6号液) | 1支; | |
3.洗涤液(2号液) | 1支; | 8. 阳性对照品 | 1支; | |
4.底物(3号液) | 1支; | 9. 阴性对照品 | 1支; | |
5.显色剂(4号液) | 1支; | 10.使用说明书 | 1份; |
操作程序
1. 加样反应:取出所需量的反应板条,每孔加样本稀释液(5号液)2滴,再分别加入待检的血清样本10ul,混匀。同时设阴性、阳性及空白对照各1孔,阴性、阳性对照与待检样本同步处理,空白对照孔仅加入样本稀释液(5号液)2滴。37℃避光反应60分钟后甩去孔内液体,每孔加洗涤液(2号液)1滴,立即用蒸馏水注满,静置30秒后甩去,再直接用蒸馏水洗涤四次,甩去,拍干。
2. 加酶反应:除空白对照孔外其余每孔加酶结合物(1号液)2滴,37℃避光反应60分钟后甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。
3. 显色反应:加底物(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃下避光显色10分钟。加终止液(6号液)1滴,混匀,终止反应(加终止液后蓝色会变为黄色)并观察结果。
结果判断
1.肉眼观察:阴性对照接近无色,阳性对照呈明显黄色,表示试验有效。待检孔接近无色表示该标本为阴性,待检孔呈明显黄色表示该标本为阳性。
2.仪器判断:以空白对照调零用酶标仪于450nm(620nm作参比波长)读取O.D值,待检孔O.D值大于阴性对照2.1倍者为阳性。当阴性对照O.D值低于0.05时按0.05计算。
注意事项
1. 试剂盒在2-8℃下保存,每次取出时先平衡至室温后使用。滴瓶每次用后一定要将盖拧紧,各瓶盖之间切不可混用。各试剂盒之间不可混用。
2. 如阴阳对照为冻干品时,请先按标示加入蒸馏水溶解后使用。
3. 洗涤时将蒸馏水加满孔内,每次停放三十秒钟,甩去孔内液体。禁用自来水等其它水源。
4. 为提高试验的可比性,建议使用仪器判读结果。
5. 如有条件,最好使用水浴箱孵育。
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什么是肺吸虫?
并殖吸虫病(paragonimiasis)又名肺吸虫病,为一种称人兽共患疾病。临床表现主要有发热、咳嗽、胸痛、咳痰等,因病变多发生在肺部故又称肺吸虫病。本病流行于亚洲、非洲、拉丁美洲及大洋洲许多国家。