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流式细胞技术在乳品检测中的应用(体细胞+细菌检测)

放大字体  缩小字体 发布日期:2017-03-29
核心提示:乳及乳制品,是营养较全面,人体吸收和利用率较高的食品。它不但是婴幼儿,老人和病体弱者的营养补给品,而且已成为人们的日常食品。然而,由于乳及乳制品本身富含各种营养物,并具有液体和粉状的特点,容易成为适宜各类微生物生长的培养基,或成为某些有毒有害物质污染的载体。
   乳及乳制品,是营养较全面,人体吸收和利用率较高的食品。它不但是婴幼儿,老人和病体弱者的营养补给品,而且已成为人们的日常食品。然而,由于乳及乳制品本身富含各种营养物,并具有液体和粉状的特点,容易成为适宜各类微生物生长的培养基,或成为某些有毒有害物质污染的载体。所以,对乳制品卫生,必需予以足够的重视,在原料乳生产、加工、销售等环节中,乳品厂保证卫生安全显得尤为重要。对乳品卫生安全乳制品中的监控包含两方面的含义,其一是对乳制品中的体细胞数检测,另外是对其中细菌总数的检测。
 
  牛奶中的体细胞,多数是白细胞,(即巨噬细胞,噬中性白细胞和淋巴细胞)约占牛体细胞数的98%-99%,其他1%-2%的体细胞是上皮细胞。
 
  体细胞数简称为SCC,通常以每毫升牛奶千个细胞来计数。影响牛奶体细胞数的因素很多。一般来说,传染性乳房炎是微生物引起体细胞数增加的主要原因。当乳房外伤或发生疾病产生炎症时,机体将大量的白细胞分泌进入乳房以清除感染。牛奶体细胞数不可能为零,但多数牛群可以将牛奶体细胞数控制在15万以下,这就表明牛群隐性乳房炎发病率很低,乳腺组织损伤小,产奶量高,牛奶质量好。
 
  近年来几乎所有国家均将牛奶体细胞数(或细菌数)作为牛奶收购标准之一。在英国1994年1月份规定加工消毒奶的原料奶体细胞不超过40万,加工成其他奶制品的原料奶体细胞数不超过50万;1997年7月份又对该规定进行了修改,所有原料奶的体细胞数不允许超过40万。在瑞典,现在将牛奶体细胞数分成5个等级。I级奶SCC≤200000,每千克奶增加0.02SEK;II级奶SCC为200001~250000,每千克奶增加0.01SEK;III级奶SCC为250001~350000,每千克奶价格为基础价,即不加价,也不减价;IV级奶SCC为350001~700000,每千克奶减价0.10SEK;V级奶SCC>700000,其价格为每千克奶减少0.4SEK。(瑞典原料奶基础价为2.95SEK/kg,1$=9.10SEK)。
 
  在细菌计数方法上,由于平板计数法需要长时间的培养,使得细菌污染的检测时间拖延。另外,这些方法较低的结果重复性也引起了更多的注意力。同样,使用传统计数方法不能及时的检测出奶厂生产过程中的污染情况,因此如果能够采用及时,快速的方法,在牛奶收购中,就可以很快地获得可靠的实验结果,甚至实现在线的测试,检测原料奶以剔除不合格的和对合格奶源放行。
 
  基于上述原因,目前,在乳品行业,采用直接的细菌和体细胞计数-基于流式细胞计数技术显得尤为必要。这种流式细胞技术(以BactoScan FC设备为例)的原理如下:
  (1)将乳制品样品用特定的液体培养基培养和机械处理后,形成分散度好的样品。
 
  (2)细菌或体细胞用特定的染色液染色。
 
  (3)用非常精确的注射器使得细菌或体细胞一个接一个通过检测器
 
  (4)测定时,让激光光束(蓝色)通过测定样品,染色的细菌或体细胞发射回应光束(红色),每一个染色的细菌或体细胞通过光束就会产生一个光脉冲。
 
  (5)电子荧光器件记录脉冲数,通过PC检测器显示脉冲高度分析图谱,得出细菌或体细胞计数结果。
 
  与其他的传统细菌计数方法相比,流式细胞技术对细菌直接计数而没有传统计数方法需培养细菌长成为菌落计数所带来的繁琐。
 
  丹麦福斯公司的全自动的BactoScan FC细菌计数仪正是基于流式细胞技术对单个细菌细胞进行计数,能够给出可重复性和可信的结果。这极大的提高了由于人为因素和不能准确计数细菌集合体的单个细胞的计数方法的准确率问题。因为许多实验结果表明在不同的实验室,由于对同一牛奶样品的处理不同,平板计数结果会产生很大的偏差。
 
  丹麦福斯公司还提供基于流式细胞技术的体细胞分析仪Fossomatic FC,为牛群改良项目和按质论价体系服务,目前推出的combiFoss 7在体细胞检测这块又有新突破,可以测定牛奶中体细胞的不同分型,为亚临床乳腺炎前期感染的抗生素用药提供了指导原则。具体内容可参考本公众号的前期内容,有关DMCC的知识分享。
 
  如今国外的CMT(Central Milk Testing)实验室高度自动化,在这些实验室,每天能处理数以千计的样品。在国内乳品行业,选择快速准确的基于新的技术的细菌或体细胞计数仪来进行原奶卫生学质量检测也在大规模的应用中。可以预计,随着流式细胞技术的不断更新和改进,未来的牛奶卫生学检测也将更加自动化,智能化和准确化.
 
 
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