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徐丽广教授-B族维生素快速免疫分析方法-特膳食品、特医食品行业发展和质量安全论坛专家报告

放大字体  缩小字体 发布日期:2018-11-08
核心提示:B族维生素快速免疫分析方法
   徐丽广   教 授
 
  江南大学教务处 处长助理
 
  江南大学食品学院
 
  徐丽广,男,博士,江南大学食品学院教授,博士生导师,江苏省自然科学基金杰出青年基金获得者、江苏省优秀博士学位论文获得者,分别于2009年和2012年获江南大学硕士和博士学位,导师为胥传来教授,2015年2月至2016年3月于美国密歇根大学从事博士后研究,合作导师为Nicholas A. Kotov教授。目前,主要从事食品安全方面的研究工作。先后承担了江苏省自然科学基金杰出青年基金、国家自然科学基金、国家重点研发计划、科技部“863”计划、国家重大科学仪器设备专项、国家科技支撑项目和质检公益性行业科研专项等多个项目。发表以第一作者或者通信作者发表SCI论文53 篇,其中IF>10.0共16 篇,包括《Chemical Society Reviews》、《Accounts of Chemical Research》、《Journal of the American Chemical Society》、《Angewandte Chemie International Edition》、《Advanced Materials》、《Advanced Functional Materials》和《Food Chemistry》等,论文被《Science》、《Nature》、《Nature Materials》等SCI杂志正面他引超过4 500 次,个人H-index为40;以第一发明人申请国家发明专利32 项,获得国家授权发明专利24 项,美国发明专利授权3 项。荣获2017年度国家科技进步奖二等奖(第5)、2017年度山东省科技进步奖二等奖(第3)、2013年度教育部高等学校科学研究优秀成果奖(科学技术)科技进步一等奖(第3)、2012年度湖南省自然科学奖一等奖(第5)、教育部2010年度教育部高等学校科学研究优秀成果奖(科学技术)科技进步奖二等奖(第7);2018年入选江苏省科协青年科技人才托举工程项目。
 
  发言题目
 
  B族维生素快速免疫分析方法
 
  摘 要
 
  维生素是人体不可缺少的营养物质之一,也是评价食品和药品品质的重要标准。常规的色谱、质谱方法均需要复杂的提取、净化处理过程,无法实现批量样品中维生素的快速检测。免疫学分析方法具有快速、高灵敏度和高通量等优点,被广泛应用于食品检测。通过琥珀酸酐法衍生25-羟基维生素D3得到带有羧基的半抗原。将维生素B2、维生素B7和25-羟基维生素D3半抗原分别与载体蛋白偶联得到相应的完全抗原。通过免疫和细胞融合及亚克隆筛选出最佳的杂交瘤细胞株,制备并纯化腹水得到维生素B2抗体3H8、维生素B7抗体4A3、25-羟基维生素D3抗体2A3,亲和常数分别为1.3×109、3.1×109和0.91×109 L/mol,均为高亲和力抗体,抗体亚型分别为IgG2b、IgG1和IgG2b。通过对pH值、离子强度及甲醇含量进行优化,最优条件下,基于维生素B2抗体3H8、维生素B7抗体4A3及25-羟基维生素D3抗体2A3建立相应的间接竞争酶联免疫方法。其半数抑制浓度(IC50)分别为8.180、9.785和99.018 ng/mL,3 种抗体的交叉反应率均低于1%,说明抗体具有较强特异性。添加回收实验中回收率在87.4%~108.3%之间,变异系数均低于10.0%。此外,建立了相应的胶体金试纸条用于实际样品检测,饮料和牛乳样品中维生素B2的检测限均为50 ng/mL,饮料样品中维生素B7的检测限为50 ng/mL,牛乳样品中维生素B7的检测限为150 ng/mL,血清样品中25-羟基维生素D3的检测限为400 ng/mL。
 
 
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