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微生物检测方法的比较

放大字体  缩小字体 发布日期:2017-09-07
核心提示:2015版药典颁布后,微生物检测方法大致划为三种:平皿法、MPN法及薄膜过滤法,平时大家在微生物检测中可能都会有用到。下面为大家总结概括一下,这三种方法的优缺点。以便在对不同性状的样品进行微生物检测时,可以选用不同的检测方法从而能够较客观准确地反映样品中微生物的数量。
   2015版药典颁布后,微生物检测方法大致划为三种:平皿法、MPN法及薄膜过滤法,平时大家在微生物检测中可能都会有用到。下面为大家总结概括一下,这三种方法的优缺点。以便在对不同性状的样品进行微生物检测时,可以选用不同的检测方法从而能够较客观准确地反映样品中微生物的数量。
 
  1平皿法
 
  传统的微生物检测方法,主要有:划线、涂布和倾注。直接将样品置于培养基上或培养基中进行培养观察。
 
  划线法适合做阳性菌接种,同时适合对单一菌落进行分离且聚落形态呈线性生长,但划线法的操作难度大,容易将琼脂划破,而且不同菌落使用不同接种环,容易交叉污染。
 
  涂布法是一种简单快捷、可用于固体等不可过滤样品、适合广泛的选择性琼脂传统的微生物检测方法  但它存在技术不准确、样品体积有限、无法除去抑制剂等缺点。
 
  倾注法与涂布法相似,优点是简单快速,适合广泛的选择性琼脂,可用于固体等不可过滤样品,缺点是样品体积有限,无法除去抑制剂,无法观察到典型菌落形态,技术不准确,容易连片。
  2MPN法(最大可能数法)
 
  也称稀释培养计数,制备3个连续稀释级供试液,每一稀释级取3份1mL分别接种至3管液体培养基中,培养后观察是否有微生物生长,根据微生物生长的管数从表中查需氧菌总数的最可能数。
  优点:
 
  传统方法
 
  广泛的选择性液体培养基
 
  用于不同性状类型的产品
 
  缺点:
 
  工作量大
 
  多步稀释和操作
 
  额外的准备和清洁时间
 
  无法计数(微生物的可能数量)
 
  需要附加实验确认
 
  3薄膜过滤法
 
  膜过滤法所采用的滤膜孔径应不大于0.45pm(该孔径可以有效截留90%以上的微生物),直径一般为50mm。供试品及其溶剂应不影响滤膜材质对微生物的截留。使用时,应保证滤膜在过滤前后的完整性。应注意保持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面,从而使滤膜发挥最大过滤效率。
  优点:
 
  可将抑菌物质冲洗掉
 
  可测试大体积样品
 
  统计学意义上更可靠
 
  敏感度高,可达1CFU
 
  缺点:
 
  只适用可过滤样品
 
  固体颗粒可能会堵膜
 
  总结:
 
  根据不同的样品选择合适的方法检测,能够更加客观的反映样品中微生物的含量,从而制定相应的内控参数以符合样品放行的标准。
 
 
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