来自内蒙古农业大学食品科学与工程学院的钱书意、李侠和孙 圳等人以不同饲养条件下（放牧和圈养）12 月龄苏尼特羊背最长肌为实验材料，对AMPK活力、AMPK基因mRNA相对表达量以及糖酵解指标进行测定，并分析了AMPK与糖酵解指标之间的相关性，旨在为通过调控AMPK活性改善宰后肉品品质提供依据。
1.饲养方式对肉质指标的影响
放牧条件下苏尼特羊背最长肌的剪切力值显着大于圈养条件（P＜0.05），这可能与不同饲养方式下骨骼肌肌纤维的发育、肌肉脂肪的含量以及水分含量有关。放牧条件下苏尼特羊背最长肌的L*值、a*值以及b*值均大于圈养条件，其中L*值和b*值差异显着（P＜0.05）。两种饲养方式的pH1值和pH24值差异不显着（P＞0.05）。
2.饲养方式对苏尼特羊AMPK活力和基因相对表达量的影响
2.1 饲养方式对AMPK活力的影响
放牧条件下苏尼特羊AMPK活力低于圈养条件下，但两种饲养方式差异不显着。但两种饲养方式AMPK活力差异不显着（P＞0.05），说明饲养方式对AMPK活力影响较小。
2.2 AMPK基因相对表达量测定结果
2.2.1 总RNA提取结果
提取的总RNA 3 条条带（28S、18S、5S）完整且清晰明亮，说明所提取的总RNA并无降解。经核酸蛋白分析仪检测，A260 nm/A280 nm均在1.8～2.1之间，说明提取的总RNA的纯度高，并未被污染，可用于后续的反转录实验。
2.2.2 实时荧光PCR产物结果
4 个基因的条带单一且清晰明亮，说明经PCR反应后得到的扩增产物单一，没有引物二聚体和非特异性产物，将目的基因的片段与DL1000 DNA Marker比较，其条带大小与所设计的引物目的产物片段大小相一致，说明所设计的引物反应性能良好，符合实时荧光PCR实验要求，经实时荧光PCR后的产物为本实验所需产物。
2.2.3 AMPK基因表达规律
不同饲养条件下，苏尼特羊PRKAA1和PRKAG3基因的相对表达量均为圈养条件高于放牧条件，且差异显着（P＜0.05），而PRKAA2基因相对表达量为放牧条件显着大于圈养条件（P＜0.05）。
3.饲养方式对苏尼特羊宰后糖酵解指标的影响
苏尼特羊背最长肌己糖激酶的活力为圈养条件高于放牧条件，但两种饲养方式差异不显着（P＞0.05）；乳酸含量也为圈养条件大于放牧条件，且差异显着（P＜0.05）；放牧条件下肌糖原含量高于圈养条件，但差异不显着（P＞0.05）。
4.AMPK与糖酵解指标及肉品品质的相关性
4.1 AMPK活力与糖酵解指标及肉品品质的相关性
AMPK活力与己糖激酶活力以及乳酸含量均呈显着正相关（P＜0.05），与肌糖原含量相关程度很低（P＞0.05），与剪切力、色泽以及pH值均呈负相关（P＜0.05）。
4.2 AMPK基因相对表达量与AMPK活力、糖酵解指标以及肉品品质的相关性
PRKAA1、PRKAA2和PRKAG3基因相对表达量均与AMPK活力呈正相关，其中PRKAG3基因相对表达量均与AMPK活力呈显着正相关（P＜0.05），说明这3 个基因的相对表达量与AMPK活力变化趋势相一致。PRKAA1和PRKAG3基因相对表达量与己糖激酶活力呈正相关，其中PRKAG3基因相对表达量与己糖激酶活力呈显着正相关（P＜0.05），而PRKAA2基因相对表达量与己糖激酶活力呈负相关，但相关程度较低。PRKAA1和PRKAG3基因相对表达量均与乳酸含量呈显着正相关（P＜0.05）。3 个基因的相对表达量与肌糖原含量均呈负相关，但相关程度较低。PRKAG3基因相对表达量与剪切力呈显着负相关（P＜0.05）。
结 论
放牧条件下苏尼特羊背最长肌的剪切力、亮度值以及黄度值均显着大于圈养条件（P＜0.05）；两种饲养方式的胴体初pH值（pH1）和静止排酸24 h后胴体最终pH值（pH24）差异不显着（P＞0.05）；圈养条件下苏尼特羊PRKAA1和PRKAG3基因的相对表达量显着大于放牧条件（P＜0.05），PRKAA2基因相对表达量显着小于放牧条件（P＜0.05）；AMPK活力和己糖激酶活力均为圈养条件大于放牧条件，但差异不显着（P＞0.05）；圈养条件下乳酸含量显着大于放牧条件（P＜0.05）。通过相关性分析可知：PRKAG3基因相对表达量与AMPK活力、己糖激酶活力以及乳酸含量均呈显着正相关（P＜0.05），与剪切力呈显着负相关（P＜0.05）；PRKAA1基因相对表达量仅与乳酸含量呈显着正相关（P＜0.05）；PRKAA2基因相对表达量与AMPK活力以及糖酵解指标无显着相关性；AMPK活力和己糖激酶活力以及乳酸含量均呈显着正相关（P＜0.05）。综上所述，PRKAA1和PRKAG3基因相对表达量高时，AMPK被激活，使己糖激酶活力增加，加速组织内的糖酵解，增加肌肉乳酸含量，降低pH值，进而影响肉的品质。
