北华大学药学院的冯晴霞、安丽萍*和中国人民解放军总医院血液科的卢学春*等人优化姬松茸多肽的提取方法，通过建立D-半乳糖（D-galactose，D-gal）诱导的小鼠衰老模型，观察姬松茸多肽对衰老模型小鼠的保护作用，为姬松茸的应用提供更多的理论及实验依据。
1、姬松茸多肽的纯化结果
经过Sephadex-50葡聚糖凝胶过滤后洗脱，洗脱曲线出现2 个波峰，12 min处呈现出1 个明显的波峰即为姬松茸多肽。
2、姬松茸多肽的Tricine-SDS-PAGE结果
酶解后的姬松茸粗多肽级分分子质量在6～70 kDa内均有分布；而经Sephadex-50葡聚糖凝胶纯化后的姬松茸多肽提取物，显示均一条带，分子质量在10 kDa左右。
3、姬松茸多肽对小鼠一般情况的影响
给药实验结束后，空白组小鼠组行动活跃，反应灵敏，且毛色光滑。模型组小鼠毛色发黄、无光泽，皮肤松弛，行动缓慢，精神萎靡，四肢无力，易抓取，呈趴伏蜷缩态，出现明显的衰老特征。姬松茸多肽组与阳性药物组小鼠毛色发暗、脏乱，但无明显毛发稀疏的现象，其中个别呈趴伏蜷缩态，且有弓背现象，剩余小鼠外观及状态介于空白组与模型组之间。
4、小鼠避暗实验结果
与空白组比较，模型组小鼠避暗实验2 d内错误次数显着增高，潜伏期时间（48 h）显着缩短（P＜0.05）；与模型组比较，阳性药物组小鼠错误次数显着减少（P＜0.05），潜伏期时间（48 h）显着延长（P＜0.05），姬松茸多肽组小鼠错误次数显着减少（P＜0.05或P＜0.01），潜伏期时间（48 h）极显着延长（P＜0.01）。
5、Morris水迷宫实验结果
与空白组比较，模型组小鼠在定位航行（水迷宫实验）中的逃避潜伏期（除第1天）显着延长（P＜0.05或P＜0.01），同时中心区和中环的穿梭次数显着减少（P＜0.05或P＜0.01），目标象限的穿梭次数稍有减少但不显着。与模型组比较，姬松茸多肽组小鼠定位航行中的逃避潜伏期显着缩短，且实验期内呈递减趋势，第6天时逃避潜伏期仅为24.23 s，较模型组（85.28 s）极显着降低（P＜0.01）。
6、姬松茸多肽对小鼠血清生化指标的影响
与空白组比较，模型组小鼠血清MDA浓度极显着升高（P＜0.01），ROS水平显着升高（P＜0.05），CAT活力和T-AOC显着降低（P＜0.05）。与模型组比较，姬松茸多肽组小鼠血清MDA浓度显着降低（P＜0.05），ROS水平极显着降低（P＜0.01），CAT活力和T-AOC极显着升高（P＜0.01）。
7、小鼠脑组织海马区神经元形态学变化
空白组小鼠脑组织海马区神经元排列紧密有序，胞核和胞浆清晰可见，单个细胞面积较大。而模型组与空白组相比，小鼠脑组织海马区锥体神经元结构松散，排列稀疏，间隙增大，正常锥体神经元数量明显减少，大部分细胞出现核固缩，细胞形态不一。姬松茸多肽干预后小鼠海马锥体细胞形态基本保持正常，与模型组比较排列紧密，间隙减少，层次清晰，形状体积均一。
8、姬松茸多肽对脑组织中Nrf2、NQO1、GCLM基因表达的影响
与空白组相比，模型组小鼠脑组织Nrf2、NQO1、GCLM mRNA相对表达量显着降低（P＜0.05）；与模型组相比，姬松茸多肽组小鼠脑组织中Nrf2 mRNA相对表达量显着增高（P＜0.05），诱导其下游靶基因NQO1、GCLM mRNA相对表达量显着增高（P＜0.05）。进一步验证有可能通过影响Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Keap1）/Nrf2/抗氧化反应元件（ARE）信号通路中Nrf2、NQO1、GCLM表达而发挥相关作用。
讨 论
综上所述，姬松茸多肽提取物对D-gal诱导的衰老小鼠具有保护作用，该作用为开发姬松茸系列产品提供理论参考。
