说起蛋白质检测，很多人想到的是GB5009.5-2010《食品中蛋白质的测定》第一法凯氏定氮法。但在蛋白质的日常检测中，不同的样品有时会用到不同的方法。今天就让小编带你认识一下GB5009.5-2010《食品中蛋白质的测定》第三法：燃烧法。
蛋白质检测新面孔
凡事都讲一个理字，所以我们先来了解一下“燃烧法”的基本原理。
原理
样品在900℃~1200℃高温下燃烧，燃烧过程中产生混合气体，其中的干扰成分被一系列适当的吸收剂所吸收，混合气体中的氮氧化物被全部还原成分子氮，随后氮的含量被热导检测器检测。
简单来说，记住四个步骤八个字：
燃烧 →还原→净化→检测。
那么问题来了，凯氏定氮法作为最常用的蛋白质检测方法，其普遍适用性、精确性和重复性已经得到了国际的广泛认可，为什么还要有燃烧法呢？
经过一段时间的研究后才知道，原来与凯氏定氮法相比，燃烧法具有以下优点：
一
操作简便 检测周期短
凯氏定氮法需要通过使用浓硫酸和较长时间的加热消化进行样品前处理。而用燃烧法检测样品无需消化，自动进样，5-8分钟即可完成一个样品的检测。
二
检测数据误差更低
由于凯氏定氮法与燃烧法在实验原理上的不同，在实际检测中，同个样品用两种方法检测有时会出现不同的结果，而且实验发现燃烧法检测出来的数据略高于凯氏定氮法。
这是为什么呢？相信大家一定很好奇，请听小编我继续讲来。
这是因为凯氏定氮法的局限性：即难以把有机物定量转变成氨，特别是含有硝酸盐的样品会影响总氮的结果。而燃烧法则没有这个问题，能够将样品中的氮元素全部检测出来。以鱼粉样品为例，凯氏法只能测定出鱼粉中的有机氮，而燃烧法可以测出有机氮和无机氮。这种方法检测鱼粉的比凯氏法要高1-2%蛋白。
三
检测过程少污染
蛋白质燃烧法检测过程中不产生有毒有害物质，清洁，环保。而凯氏定氮法所用试剂为强酸强碱，具有强腐蚀性，检测后留下的废碱也需交与专业废液处理机构处理。
说得那么好，好像燃烧法有将凯氏定氮法取而代之的意思。但其实不然，凡事皆有两面性，燃烧法也有属于其的局限性。
1
对于不均匀的复杂样品分析难度较大
样品需要确保研磨均匀而且要较细颗粒，否则将出现燃烧不完全的情况，进而影响后续的检测结果。
2
仪器耗材消耗快 仪器昂贵 检测成本高
在净化过程中，燃烧过程中产生混合气体被适当的吸收剂除去。这些吸收剂在大批量的样品检测中有较大的消耗量，需经常更换（如用来吸收酸的铁丝；用来吸收氯的黄铜；用来吸收多余氧化物的碳粒以及吸水剂高氯酸镁等）。而且燃烧法中用到的仪器杜马斯定氮仪本身价格也不斐，因此限制了这一方法的推广和应用。
综上所述，蛋白质的检测方法各有优缺点，没有绝对的好坏，毕竟，适合的才是最好的。
