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MPN计数法

放大字体  缩小字体 发布日期:2017-08-15
核心提示:MPN计数法是一种特殊的微生物定量检测方法,小编以大肠菌群计数为例,并通过与平板计数法的比较,闲聊一下MPN计数法。
   MPN计数法是一种特殊的微生物定量检测方法,小编以大肠菌群计数为例,并通过与平板计数法的比较,闲聊一下MPN计数法。
 
  一、原理
 
  MPN计数法与平板计数法的结果可以不相同吗?
 
  MPN法是统计学与微生物学结合的一种定量检测方法。是待测样品经系列稀释并培养后,根据其未生长的最低稀释度与生长的最高稀释度,应用统计学概率论来推算出待测样品中大肠菌群的最可能数。
  平板计数法是对大肠菌群在固体培养基中发酵乳糖产酸,在指示剂的作用下形成可计数的红色或紫色,带有或不带有沉淀环的菌落进行直接计数。
  由于检验原理不同,MPN计数法与平板计数法的结果可以不相同。
 
  二、适用范围
 
  MPN法适用的大肠菌群含量是多少?
 
  GB 4789.3-2016中有一句话,“本标准第一法适用于大肠菌群含量较低的食品中大肠菌群的计数;第二法适用于大肠菌群含量较高的食品中大肠菌群的计数。”但何为大肠菌群含量较低,何为大肠菌群含量较高,国家标准中没有明确。
 
  ISO标准大多以100/ g(mL)为大肠菌群含量高低的分界线,其标准明确指出MPN法适用于大肠菌群含量为1-100/ g(mL)的样品计数,平板计数法适用于大肠菌群含量超过100/ g(mL)的样品计数。但国外标准中也有以5/g(mL)为大肠菌群含量高低的分界线的,但总的说来MPN法适用于大肠菌群含量较低的样品计数。所以呢,如果GB 19302-2010中大肠菌群的检验方法指定为MPN计数法的话,小编也就没有必要长篇累牍地写“发酵乳的coliform检验, Mission:Impossible?”了。嘿嘿
 
  三、优点
 
  MPN法的最大优点是什么?
 
  与平板计数法相比,MPN计数法的最大优点是灵敏度高。首先,MPN计数法采用的检样量大,其灵敏度也高。有研究表明,当大肠菌群含量为1/ mL时,取1 mL检样,其中含有大肠菌群的可能性约为63%;若取5个1 mL检样,其中含有大肠菌群的可能性则大于99%.
 
  其次,MPN计数法有利于受损大肠菌群的修复。由于食品加工工艺、加工环境的消毒处理、食品中的化学物、酸性的pH 值可能会损伤大肠菌群,但液体培养基比固体培养基更有利于为受损大肠菌群的修复,这也是MPN计数法灵敏度高的原因之一。所以需要特别指出的是,当采用平板计数法检验大肠菌群时,如果菌落数与稀释度不成比例,则需要考虑存在大肠菌群受损的情况。
 
  第三,对VRBA上大肠菌群不典型菌落的鉴别经验不足,造成的漏检,也是MPN计数法比平板计数法灵敏度高的原因之一。
 
  四、缺点
 
  MPN法的致命缺点又是啥?
 
  与平板计数法相比,MPN计数法也存在致命的缺点,那就是精密度低。MPN计数法每个稀释度使用的平行管越少,其精密度越低,也就是说,3管MPN法较5管MPN法的精密度低。有文献报道,当大肠菌群含量为8/ mL时,10管MPN法的精密度平板计数法的精密度相当。然而,但当大肠菌群含量<5/ mL时,平板计数法的精密度也会急剧下降。
 
  严格地讲,MPN计数法的结果只代表一个范围,而不是一个确切的数值。有报道指出,3管法MPN值的95%可信限范围,是其MPN值的三十多倍。
 
  对平板计数而言,当大肠菌群菌落在一定范围时,其精密度会随着菌落数的增加而增高。一般而言,平板计数结果的95%可信限范围,是菌落计数值的三倍左右。所以在精密度方面,平板计数法比MPN法具有较大的优势。此外,MPN法还有操作较繁琐、不能看到实际菌落的缺点,在此不再赘述。
 
  总之, MPN计数法与平板计数法各有优缺点,要根据产品的特性和检验目的来选择合适的检验方法。
 
  (4)
 
  参考文献:
 
  1. ISO 4832:2006 Microbiology of food and animal feeding stuffs -- Horizontal method for the enumeration of coliforms -- colony-count technique
 
  2. N D Cowhx , M D Morisetti. Microbiological sampling plans - Statistical aspects[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture, 1969,20(10):573-579.
 
  3. R L Woodward. How Probable Is the Most Probable Number [J]. Journal American Water Works Association, 1957,49(8):1060-1068.
 
  4. M H Mccrady,J Archambault. Examining Dairy Products for Members of the Escherichia-Aerobacter Group [J]. American Journal of Public Health, 1934,24(2):122-128.
 
 
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