首先，QA主管每年初要和QC主管确定《年度验证计划》，其中包括微生物检测室《立式灭菌器灭菌效果验证计划》。
其次，由QA主管编写《立式灭菌器灭菌效果验证方案》，经审批后组织相关人员培训。随后要对《立式灭菌器灭菌效果验证方案》所涉及的立式灭菌器，生物指示剂、培养箱、进行确认形成相关的确认记录。
再次，由QA主管组织QC主管、指定QA、微生物检测员实施《立式灭菌器灭菌效果验证方案》。
立式灭菌器灭菌效果验证工作有：
第一步，立式灭菌器、生物指示剂、培养箱的再次确认。将确认正确的生物指示剂拍照作为对照证据（照片1）。
第二步，生物指示剂灭菌。把生物指示剂按照上、中、下三个位置放入灭菌锅，并且每层按照120°（立式灭菌器内筒是圆柱形）放置1个，即每层放3个，一个灭菌器一次放置9个生物指示剂。按照微生物检验操作升温到121℃，并保持15min后，关掉灭菌器电源，待灭菌器温度和压力降至安全范围后，打开灭菌器取出生物指示剂，并检查生物指示剂的完整性，拍照留作证据（照片2）。
第三步，生物指示剂培养。将检查完整的生物指示剂在55℃培养箱培养48h后，取出判定结果，拍照留作证据（照片3）。第四步，生物指示剂培养前后对比。即将照片3与照片1作对比，如果没有发生颜色变化证明微生物检测室立式灭菌锅杀菌效果良好，可以杀灭孢子菌，否则检讨微生物检测室灭菌程序。
最后，根据《立式灭菌器灭菌效果验证方案》以及《立式灭菌器灭菌效果验证记录》由QA主管编写《立式灭菌器灭菌效果验证报告》。报告经审批后正本和《立式灭菌器灭菌效果验证方案》正本由QA保存，复印件发放给微生物检测室。
PS：化验室立式灭菌器验证频率可根据公司实际情况而定。一般情况下一年一次。验证前，灭菌器温度监控系统和培养箱温度监控系统需要校验并确认合格。如果当年灭菌器有维护，比如更换密封圈则需要维护结束进行一次验证。
