不同的细胞及转染试剂要求转染的条件是不同的。最好是在第一次实验前做一个预实验,比如:HeLa,293,CHO,COS7, MCF-7,HepG2等细胞,是否加血清,对不同的细胞是有不同的影响的,有些细胞是可以有血清的,有些加血清就会受影响。所以,普通的转染试剂一定要进行预实验,和条件优化。
转染后在6小时左右最好换液且换为有血清的培养基,其一因为普通转染试剂对细胞的毒性作用大,其二可降低因血清的缺乏引起的细胞的死亡。转染时不加血清是防止血清的干扰作用,转染后可适时加入。加入过早会引起未转染细胞的优势生长,过晚会引起较多细胞死亡。可实时观察1/5细胞变圆的时候加入血清。
现在市面上也有一些改进了的转染试剂,可以在转染时含有血清;也有一些公司完全改变了产品性质,使转染过程更加简便,效率更高。
细胞毒性的大小往往意味着对细胞生理活动影响的大小。这会对相关研究数据产生严重的干扰,甚至影响研究的结论。因此,适当的预实验是必要的!