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转染可以加血清吗?

放大字体  缩小字体 发布日期:2018-09-04
核心提示:传统的转染试剂有一定的细胞毒性,在转染过程由于提高细胞的通透性因而不能在培养基中添加抗生素。如,阳离子脂质体。带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞。
   传统的转染试剂有一定的细胞毒性,在转染过程由于提高细胞的通透性因而不能在培养基中添加抗生素。如,阳离子脂质体。带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞。血清中含有大量的蛋白质,在转染过程中,带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附,影响转染效率。另外,使用脂质体等转染试剂时,由于含血清转染会将血清中的蛋白带入细胞,引发细胞毒性,导致转染效率降低,故不能有血清转染。这些转染试剂要求在转染前换无血清培养基,转染后4-6h在更换成有血清培养基,这其实是为了减轻转染造成的细胞毒性。
 
  不同的细胞及转染试剂要求转染的条件是不同的。最好是在第一次实验前做一个预实验,比如:HeLa,293,CHO,COS7, MCF-7,HepG2等细胞,是否加血清,对不同的细胞是有不同的影响的,有些细胞是可以有血清的,有些加血清就会受影响。所以,普通的转染试剂一定要进行预实验,和条件优化。
 
  转染后在6小时左右最好换液且换为有血清的培养基,其一因为普通转染试剂对细胞的毒性作用大,其二可降低因血清的缺乏引起的细胞的死亡。转染时不加血清是防止血清的干扰作用,转染后可适时加入。加入过早会引起未转染细胞的优势生长,过晚会引起较多细胞死亡。可实时观察1/5细胞变圆的时候加入血清。
 
  现在市面上也有一些改进了的转染试剂,可以在转染时含有血清;也有一些公司完全改变了产品性质,使转染过程更加简便,效率更高。
 
  细胞毒性的大小往往意味着对细胞生理活动影响的大小。这会对相关研究数据产生严重的干扰,甚至影响研究的结论。因此,适当的预实验是必要的!
 
 
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