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亚硒酸钠与白藜芦醇联合应用对肺癌细胞的协同效应分析

放大字体  缩小字体 发布日期:2018-02-08
核心提示:肺癌细胞是常见的导致死亡率最高的恶性肿瘤细胞之一,肺癌分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌两种,而占死亡率80%以上的肺癌细胞是非小细胞肺癌细胞,即A549细胞。硒对肺癌、甲状腺癌、膀胱癌等均有一定的抑制效果,硒的抗癌作用机制比较复杂,明显影响癌基因和抑癌基因的表达。
   肺癌细胞是常见的导致死亡率最高的恶性肿瘤细胞之一,肺癌分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌两种,而占死亡率80%以上的肺癌细胞是非小细胞肺癌细胞,即A549细胞。硒对肺癌、甲状腺癌、膀胱癌等均有一定的抑制效果,硒的抗癌作用机制比较复杂,明显影响癌基因和抑癌基因的表达。硒元素在生物体内以硒结合蛋白的形式存在。亚硒酸钠不仅能够抑制肿瘤细胞的生长,而且还能诱导其凋亡,存在剂量-效应关系。但其有效作用范围窄,高剂量有毒副作用。白藜芦醇是一种普遍存在于自然界的植物次级代谢物,对机体无毒副作用,在抗肿瘤、心血管疾病治疗、抗氧化、抗自由基、抗病毒、预防急性传染性非典型肺炎等方面有药理作用。但白藜芦醇成本高,且对癌细胞的作用相对于亚硒酸钠效果不明显。
 
  为减轻硒作用于癌细胞时的毒副作用,来自北京联合大学的张平、万鹰昕、李楠探究了亚硒酸钠与白藜芦醇联合应用对A549细胞的协同效应。
 
  1亚硒酸钠和白藜芦醇单独用药对A549细胞存活率的影响
 
  亚硒酸钠
 
  A549细胞的存活率与亚硒酸钠浓度有关,随着亚硒酸钠浓度的升高,肺癌细胞的存活率先升高再逐渐降低,且当实验组亚硒酸钠浓度大于等于5.0 μmol/L时,细胞存活率与对照组差异极显着(P<0.01)。亚硒酸钠对A549细胞的半致死率(LD50)为4.759 μmol/L。
 
  白藜芦醇
 
  肺癌细胞的存活率与白藜芦醇浓度有关,随着白藜芦醇浓度的升高,A549细胞的存活率先升高再逐渐降低,当白藜芦醇的浓度不小于65 μmol/L时,与对照组相比,实验组A549细胞的存活率差异极显着(P<0.01)。白藜芦醇对A549细胞的LD50值为45.24 μmol/L。
 
  2亚硒酸钠和白藜芦醇联合用药对A549细胞存活率的影响
 
  不含亚硒酸钠时,A549细胞的存活率先是随着白藜芦醇浓度的升高而升高,当浓度大于25 μmol/L后,细胞存活率逐渐降低;加入亚硒酸钠后,随着白藜芦醇浓度的升高细胞存活率先降低,当白藜芦醇浓度升至约25 μmol/L后,存活率随着浓度的升高而升高。当白藜芦醇浓度一定时,随亚硒酸钠浓度的增加,细胞存活率下降,当亚硒酸钠浓度大于等于5 μmol/L时,与对照组相比,实验组A549细胞的存活率差异极显着(P<0.01),且其细胞存活率在10%~50%之间。当亚硒酸钠浓度小于等于2 μmol/L,白藜芦醇浓度为25、45 μmol/L时,A549细胞的存活率在40%~70%之间;当亚硒酸钠浓度大于2 μmol/L,白藜芦醇浓度在5、25 μmol/L时,A549细胞的存活率在15%~30%之间。
 
  3亚硒酸钠和白藜芦醇联合用药对A549细胞凋亡的影响
 
  与不加亚硒酸钠和白藜芦醇的对照组相比,单独用药组和联合用药组都能促进细胞凋亡,但亚硒酸钠组和联合用药组细胞凋亡率差异极显着(P<0.01);当2 μmol/L亚硒酸钠和25 μmol/L白藜芦醇联合用药时,与亚硒酸钠组相比,联合用药组的凋亡率差异极显着(P<0.01),说明了与其他组相比,联合用药组对A549细胞抑制作用更显着,差异更明显。当5 μmol/L亚硒酸钠和25 μmol/L白藜芦醇联合用药时,与亚硒酸钠单独用药组相比,细胞凋亡率差异极显着(P<0.01)。
 
  当亚硒酸钠浓度为2 μmol/L且白藜芦醇浓度为25 μmol/L时,A549细胞的凋亡率为(3.733±1.038)%;当亚硒酸钠浓度为5 μmol/L且白藜芦醇浓度为25 μmol/L时,A549细胞的凋亡率为(2.217±0.689)%。可见,与亚硒酸钠浓度为5 μmol/L的联合用药组相比,亚硒酸钠浓度为2 μmol/L时的联合用药组的效果差异显着(P<0.05)。
 
  4亚硒酸钠和白藜芦醇联合对A549细胞周期的影响
 
  与对照组细胞相比,亚硒酸钠组G0/G1期细胞比例显着减少,S期细胞比例显着增大(P<0.05),说明亚硒酸钠可将细胞周期阻滞在S期。而白藜芦醇组与对照组相比,G0/G1期细胞比例显着增大,S期细胞比例显着减少(P<0.05),提示白藜芦醇可将细胞周期阻滞在G0/G1期。亚硒酸钠和白藜芦醇联合用药作用于A549细胞后,G0/G1期细胞与亚硒酸钠组相比显着增多(P<0.05)。提示亚硒酸钠联合白藜芦醇作用后,可以对A549细胞形成G0/G1期阻滞,最终诱导细胞凋亡。
 
  结    论
 
  本研究分析和评价了亚硒酸钠和白藜芦醇单独用药和联合用药对A549细胞拮抗的效果,通过本研究可以初步判定亚硒酸钠和白藜芦醇的最适宜配比,为进一步研究亚硒酸钠和白藜芦醇联合用药对A549细胞的分子机制研究提供依据。总之,在一定的剂量范围之内,亚硒酸钠和白藜芦醇的联合用药对A549细胞有一定的拮抗作用,而且还能缓解亚硒酸钠的毒副作用,可为对A549细胞的临床研究提供一些依据。然而,亚硒酸钠和白藜芦醇诱导A549细胞凋亡具体机制尚需进一步研究。
 
 
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