黑灵芝是我国江西省赣南地区的一种特色资源，其作为药物和功能食品已有两千余年的应用历史，但迄今为止，有关其活性组分的研究国内外鲜有报道。来自南昌大学医学院的刘想和南昌大学食品科学与技术国家重点实验室的付王威、牛晓琴等人前期对黑灵芝的活性组分——多糖进行了分离纯化，得到的一种水溶性多糖，命名为PSG-1。活性功能研究证实黑灵芝多糖具有免疫调节、抗衰老和抗肿瘤等多种生物学活性。同时，研究发现在LPS致炎巨噬细胞中，黑灵芝多糖可显着抑制LPS介导的NO和白细胞介素（IL）-1β的过度释放，具有抗炎作用。然而，黑灵芝多糖是否可调控促炎型M1型巨噬细胞转向抗炎型M2型巨噬细胞，并由此途径改善LPS介导的炎症反应，仍需进一步阐明。
1. PSG-1对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红实验结果表明，与对照组相比，LPS对正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性有明显的增强作用。在细胞培养液中加入不同质量浓度的PSG-1后，与LPS组相比，小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性显着下降，实验结果表明PSG-1能显着抑制LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力增强。
2. PSG-1抑制LPS诱导的巨噬细胞向M1表型极化
本实验发现，与对照组相比，LPS组中的小鼠腹腔巨噬细胞培养液中IL-1β和NO的水平显着增加，腹腔巨噬细胞中ROS的生成量亦显着升高。实验结果表明LPS可诱导小鼠腹腔巨噬细胞向M1型极化。而与LPS组相比，在细胞培养液中加入不同质量浓度的PSG-1后，小鼠腹腔巨噬细胞中IL-1β、NO和ROS的水平显着下降，表明PSG-1能抑制LPS对小鼠腹腔巨噬细胞向M1型极化的诱导。
3. PSG-1促进LPS诱导的巨噬细胞向M2表型极化
本实验结果表明，与对照组相比，LPS组小鼠腹腔巨噬细胞培养上清液中IL-10的水平显着增加；荧光探针FITC-MR标记小鼠腹腔巨噬细胞，可发现MR的荧光强度显着下降。与LPS组相比，PSG-1处理可显着性上调LPS诱导的巨噬细胞中MR的表达与IL-10的水平。这些数据提示PSG-1在抑制LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞向M1型极化的同时，促进巨噬细胞向M2型极化。
4. PSG-1通过MR调控LPS诱导的巨噬细胞向M1/M2表型转化
将中性红溶液加入小鼠巨噬细胞培养上清液中，通过检测培养液的吸光度来反映巨噬细胞的吞噬活性。吞噬结果发现，应用抗MR抗体预处理后，与LPS＋PSG-1组相比，巨噬细胞的吞噬能力有所上升，即PSG-1对于LPS所介导的巨噬细胞吞噬增强的抑制作用显着下降，表明PSG-1是通过MR显着抑制LPS激活的小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。同时，抗MR抗体处理也可阻断PSG-1对小鼠腹腔巨噬细胞的M1/M2炎症表型分化的调控。与LPS＋PSG-1组相比，抗MR抗体可显着上调NO、IL-1β和ROS的生成，由此阻断PSG-1对巨噬细胞M1表型极化的抑制。观察抗MR抗体对IL-10的分泌的影响可以发现，与LPS＋PSG-1组相比，抗MR抗体预处理组中IL-10的分泌显着下降，由此提示抗MR抗体可抑制巨噬细胞的M2型极化。
结 论
与LPS组相比，黑灵芝多糖可显着降低巨噬细胞吞噬能力并抑制IL-1β、NO和ROS的生成，提示黑灵芝多糖可抑制巨噬细胞向M1表型极化。同时，黑灵芝多糖可上调LPS处理的巨噬细胞MR表达和IL-10水平，促进巨噬细胞向M2表型极化。在黑灵芝多糖＋LPS组中加入MR抑制剂，发现黑灵芝多糖抗LPS介导的炎症反应有所减弱。因此，黑灵芝多糖对LPS致炎巨噬细胞极化表型具有调控作用，且其可通过MR抑制巨噬细胞向M1表型极化而促进向M2表型极化。
