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差速离心法

放大字体  缩小字体 发布日期:2019-10-18
核心提示:通常两个组分的沉降系数差在10倍以上时可以用此法分离。
   1.工作原理
 
  通常两个组分的沉降系数差在10倍以上时可以用此法分离。例如某样品中有大、中、小三个组分,用差速离心法分离时,把样品放在离心管内,先按大组分的沉降系数选择离心转速和离心时间,当离心结束时正好使大组分全部沉降到离心管底部,这时中小组分中的一部分也会沉降到底部。若原始样品液中三个组分的含量相等,则在原始样品液中大组分占总组分量的三分之一。通过一次离心后分离出的大组分沉淀占总组分量约90%。如要进一步提纯可以把此沉淀物再溶解,再按大组分的沉降条件离心,得到大组分的第二次离心沉淀。通过多次对沉淀和上清液差速离心,可以把三个沉降系数有差别的组份分离提纯,所以这个方法又称为分步离心法。
 
  2.差速离心法的优缺点
 
  差速离心法的优点是样品的处理量较大,可用于大量样品的初分离。其缺点是分离复杂样品和要求分离纯度较高时,离心次数多,操作繁杂。由于沉淀的多次清洗、溶解、再沉淀,容易引起中间损失,所以离心分辨力差。实际分离时由于离心时的对流、扩散和收取沉淀时的污染,对于一些沉降系数相差不大的组分无法进行完全的分离提纯。产品的纯度和回收率都达不到上述理论值。因此差速离心法主要用于大量样品的初步分离提纯。
 
 
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