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桑葚浓缩汁对D-半乳糖诱导氧化损伤大鼠脾脏的保护作用

放大字体  缩小字体 发布日期:2018-04-27
核心提示:近年来,心脑血管疾病、恶性肿瘤、糖尿病等慢性疾病的发病率居高不下,严重威胁着人们的健康。研究表明,自由基过量是造成这些疾病的重要原因之一。因此,为减少过量自由基对机体的损伤及造成的衰老等病变,抗氧化物质的研究越来越受到重视,天然抗氧化物的开发已成为研究热点。
   近年来,心脑血管疾病、恶性肿瘤、糖尿病等慢性疾病的发病率居高不下,严重威胁着人们的健康。研究表明,自由基过量是造成这些疾病的重要原因之一。因此,为减少过量自由基对机体的损伤及造成的衰老等病变,抗氧化物质的研究越来越受到重视,天然抗氧化物的开发已成为研究热点。国内外研究表明,桑葚含有黄酮、多糖等多种抗氧化成分,具有清除自由基、抗氧化、防衰老等保健功效。但目前有关桑葚抗氧化、防衰老及解毒的报道多集中在某种成分的研究。
 
  因此,来自鲁东大学食品工程学院的刘亚飞、彭新颜和烟台大学生命科学学院的贺红军等人以建立D-半乳糖(D-Gal)衰老模型为切入点,研究桑葚浓缩全汁对氧化应激大鼠脾脏生化指标和炎症因子的影响,为桑葚浓缩汁在体内抗氧化作用模式及其机制研究提供理论依据,对实际生产、生活和开发天然食物具有指导意义。
 
  桑葚浓缩汁主要成分含量
 
  实验测得桑葚浓缩汁中主要营养成分及其含量为:花青素0.98 g/L、VC 44 mg/L、总酚534 mg/L、黄酮1.17 g/L、总糖6.7%。
 
  桑葚浓缩汁对大鼠脾脏T-SOD活力的影响
 
  造模后,阴性对照组大鼠脾脏T-SOD活力显着低于其他各组(P<0.05),说明造模成功,阳性对照组、正常对照组和桑葚浓缩汁高剂量组的T-SOD活力分别为(114.86±1.93)、(111.89±3.84)、(11 3 . 2 2±2 . 8 5 )U/mg p r o , 三者间差异不明显(P>0.05),桑葚浓缩汁高剂量组比阴性对照组、低剂量组分别提高了26.4%、26.6%(P<0.05),并达到了正常对照组和阳性对照组的水平,而且桑葚浓缩汁中剂量与高剂量组效果相当(P>0.05)。
 
  桑葚浓缩汁对大鼠脾脏GSH-Px活力的影响
 
  桑葚浓缩汁低、中、高剂量组GSH-Px活力分别为(68.01±3.40)、(76.36±2.45)、(90.17±4.69)U/mg pro,其中低剂量组与阴性对照组无显着差异(P>0.05),中剂量组与阴性对照组差异显着(P<0.05)。桑葚浓缩汁高剂量组效果最好,比低、中剂量组和阴性对照组分别提高了32.6%、18.1%、39.3%(P<0.05),并与正常对照组和阳性对照组无显着差异(P>0.05)。
 
  桑葚浓缩汁对大鼠脾脏CAT活力的影响
 
  桑葚浓缩汁低、中、高剂量组的CAT活力分别为(6.18±0.25)、(7.27±0.07)、(7.67±0.10)U/mg pro,与阴性对照组相比分别增加了15.1%、35.4%、42.8%(P<0.05),其中,桑葚浓缩汁中、高剂量组与低剂量组差异显着(P<0.05),但3 种桑葚浓缩汁处理组均未达到正常对照组和阳性对照组水平(P<0.05)。
 
  桑葚浓缩汁对大鼠脾脏MDA含量的影响
 
  MDA含量在阳性对照组中最低,其次为桑葚浓缩汁高剂量组和正常对照组,三者分别达到(13.07±0.99)、(13.59±1.39)、(15.40±1.38)nmol/mg,三者之间无显着差异(P>0.05),中、高剂量组显着低于低剂量组和阴性对照组(P<0.05),桑葚浓缩汁高剂量组达到了正常对照组的效果,说明桑葚浓缩汁对减轻脂质过氧化有较好的效果。
 
  桑葚浓缩汁对大鼠脾脏指数的影响
 
  与正常对照组和阳性对照组相比,阴性对照组的脾脏指数明显下降,表明D-Gal诱导大鼠脾脏指数降低,影响了机体免疫力。经桑葚浓缩汁低、中、高剂量处理后,大鼠脾脏指数均有增加,其中高剂量组的效果最为明显,含量为(4.12±0.29)mg/g,与低、中剂量组和阴性对照组相比分别增加了43.6%、26.0%、46.6%(P<0.05),并达到正常对照组和阳性对照组的水平(P>0.05),说明桑葚浓缩汁对维持氧化损伤的大鼠脾脏指数和调节机体免疫力起到重要作用。
 
  桑葚浓缩汁对大鼠脾脏TNF-α、IL-6的影响
 
  桑葚浓缩汁各处理组均可降低TNF-α水平。桑葚浓缩汁低剂量组的TNF-α质量浓度为(74.22±2.29) pg/mL,与阴性对照组无显着差异(P>0.05),中、高剂量组质量浓度分别为(68.19±3.56)、(56.95±6.14) pg/mL,相比于阴性对照组分别降低了16.5%、30.3%(P<0.05),但均未达到正常对照组与阳性对照组的水平。
 
  在IL-6方面,桑葚浓缩汁低、中、高剂量组质量浓度分别为(109.66±2.60)、(94.21±6.36)、(76.83±5.87) pg/mL,与阴性对照组相比分别降低了17.3%、29.0%、42.1%(P<0.05),三者存在明显的量效关系,其中高剂量组效果最佳,达到了正常对照组和阳性对照组的水平。
 
  桑葚浓缩汁对大鼠脾脏Caspase-9、Caspase-3的影响
 
  Caspase-9、Caspase-3的阳性表达部位均是在细胞的胞浆、胞质中,经免疫组化染色后出现棕黄色颗粒。在正常组中,Caspase-9、Caspase-3的表达率低。而阴性对照组与正常组比较,具有明显差别,Caspase-9、Caspase-3的阳性表达明显增高,出现深棕黄色颗粒。桑葚浓缩汁处理组与模型阴性对照组相比,中、高剂量组中Caspase-9、Caspase-3的表达均明显降低,低剂量组与阴性对照组比较,差异不明显。
 
  大鼠脾脏组织HE染色结果
 
  正常组脾脏在低倍镜下观察,形态结构较完整、清晰,表面被膜伸入实质内形成小梁,可见白髓及红髓区,白髓由脾小体及动脉周围淋巴鞘组成,脾小体结构清晰,可见中央动脉。阴性对照组与正常对照组相比,脾脏结构消失、欠清,红髓髓窦扩张、充有大量的红细胞,白髓淋巴细胞减少,脾小结体积变小,红髓髓索变窄,脾窦扩张淤血。桑葚浓缩汁处理组病变与阴性对照组比较,脾脏形态结构有明显改善,红髓、白髓分界较清晰,红髓区可见少量淤血,白髓淋巴小结数量均有不同程度增多,生发中心较明显,细胞分布均匀。其中以中、高剂量组较好,阳性对照组治疗效果最佳,低剂量组疗效欠佳。
 
  结 论
 
  与阴性对照组相比,桑葚浓缩汁中、高剂量组均可提高脾脏组织T-SOD、GSH-Px、CAT的活力(P<0.05),各剂量处理组均可降低MDA含量(P<0.05)及TNF-α、IL-6的表达,提高脾脏指数。其中高剂量处理组的T-SOD、GSH-Px、CAT活力分别达到了113.22、90.17、7.67 U/mg pro,作用效果明显;MDA含量降至13.59 nmol/mg,脾脏指数升至4.12 mg/g,均达到了正常对照组和阳性对照组水平(P>0.05);TNF-α、IL-6水平下降至56.95、76.83 pg/mL。免疫组化结果显示,桑葚浓缩汁处理组Caspase-9、Caspase-3的表达均有减轻,其中高剂量组效果最好。苏木素-伊红染色结果也证实,桑甚浓缩汁可保护脾脏结构,有效增加淋巴细胞数量,改善充血现象。可见,桑葚浓缩汁对氧化损伤大鼠脾脏有一定的保护作用,并呈一定的量效关系。
 
 
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