江西师范大学生命科学学院
彭仁博士在1993年获南昌大学食品工程专业学士学位，2000年获江西农业大学植物学专业硕士学位，2005—2006年在日本名古屋大学进行访问研究，2011年获华东理工大学生物化工专业博士学位。主持完成国家自然科学基金项目1项和省部级项目4项，现主持国家自然科学基金项目1项。发表论文40余篇，获国家发明专利授权2项。他目前的研究领域主要为生物催化剂的创制和应用。
报告题目
铜绿假单胞菌脂肪酶及其折叠酶的分子改造
摘 要
脂肪酶是一种多能生物催化剂，被广泛地应用于洗涤剂、食品、油脂加工、药物合成、化妆品、造纸和生物柴油制备等领域。铜绿假单胞菌脂肪酶具有较高的活性、稳定性和选择性，但该脂肪酶的活性构象的形成依赖于其特异性的折叠酶。本研究采用双元表达载体pACYCDuet-1在E.coli BL21(DE3) 中共表达铜绿假单胞菌CS-2的脂肪酶及其折叠酶。共表达体系的最佳诱导条件为：诱导时间6 h，IPTG浓度1.0 mmol/L和诱导温度 37 ℃。利用分子定向进化方法获得脂肪酶突变体R314Q，其活性提高到原来的1.65 倍。然后再利用基于分子对接的点饱和突变获得脂肪酶突变体R314W，其活性提高到原来的3.97 倍。此外利用分子定向进化方法获得折叠酶突变体G127E，最佳折叠酶突变体能使脂肪酶活性提高到原来的2.13 倍。PDBepisa分析结果表明脂肪酶和折叠酶突变体复合物的亲和力大于脂肪酶和折叠酶复合物的亲和力。本研究通过定向进化和构效关系分析相结合的方法得到脂肪酶突变体，为脂肪酶的分子改造提供了一种系统方法。此外本研究还初步揭示了折叠酶如何影响脂肪酶活性的分子机制。
