近年来的研究表明，榆干离褶伞溶栓酶（LUFE）具有保护血管内皮细胞、抑制血小板活化作用。鉴于大量饮酒对血管内皮细胞的危害性，延边大学医学院的李芳芳、丛 贺、沈明花*将以酒精诱导血管内皮细胞的损伤，探讨LUFE对酒精所致血管内皮细胞损伤的保护作用，旨在为榆干离褶伞对心脑血管系统保护作用的研究提供实验依据。
1、LUFE对细胞活力的影响
将细胞密度为1×105/mL的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）接种到96 孔板中，分为对照组、损伤组、LUFE低剂量组和LUFE高剂量组，每组设8 个复孔。待细胞贴壁后弃去陈旧培养液。损伤组及LUFE各剂量组均加入含200 mmol/L乙醇的无血清培养液，以诱导内皮细胞的损伤。对照组以等容生理盐水代替乙醇。乙醇作用4 h后，LUFE低、高剂量组分别加入1 μg/mL和4 μg/mL的LUFE，对照组和损伤组以无血清培养基代替LUFE。
与对照组相比，损伤组细胞存活率明显下降，细胞培养上清液LDH活力升高；与损伤组相比，LUFE低、高剂量组细胞存活率不同程度地升高、细胞培养上清液LDH活力下降，结果表明，LUFE对酒精诱导的HUVECs的损伤具有保护作用。
2、LUFE对细胞超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力及丙二醛（MDA）含量的影响
与对照组比较，损伤组细胞的SOD和GSH-Px活力极显着降低，而MDA水平极显着升高（P＜0.01）。与损伤组相比，LUFE高剂量组SOD和GSH-Px活力极显着升高，MDA含量极显着降低（P＜0.01）。
3、LUFE对细胞细胞总活性氧（ROS）的影响
对照组细胞的荧光强度平均值为286.80，损伤组的荧光强度为484.97，是对照组的1.7 倍，这就说明酒精作用后细胞内ROS水平极显着升高（P＜0.01）。LUFE低、高剂量组细胞荧光强度平均值分别为396.66、356.43，与损伤组相比不同程度地减少，差异显着（P＜0.05）。这就提示LUFE可以抑制酒精所致的ROS水平的升高。
4、LUFE对细胞线粒体跨膜电位的影响
与对照组（910.21）相比，损伤组的细胞荧光强度下降至633.42，差异极显着（P＜0.01），这就说明酒精作用以后细胞线粒体跨膜电位显着降低。而LUFE低、高剂量组的荧光强度分别为828.52、896.21，与损伤组相比极显着升高（P＜0.01），并随着用药剂量的增加呈升高趋势。
5、细胞AO/EB染色结果
AO/EB染色结果表明，对照组的细胞形态正常，细胞核发出绿色均匀荧光。损伤组细胞数明显减少，细胞呈现凋亡形态学改变-细胞核固缩、呈浓染的黄绿色荧光。与损伤组相比，LUFE低、高剂量组细胞数量增多，凋亡细胞明显减少，这一结果表明LUFE能抑制酒精所致的HUVECs凋亡。
6、LUFE对Bax和Bcl-2蛋白表达的影响
与对照组相比，损伤组Bax表达增加，而Bcl-2表达减少，具有显着性差异。与损伤组相比，LUFE低、高剂量组Bax表达略减少，而Bcl-2表达明显增加，这就说明LUFE降低Bax/Bcl-2比值，即具有抗凋亡作用。
7、LUFE对细胞色素c、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3蛋白表达的影响
与对照组相比，损伤组细胞色素c、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3的表达均增加。与损伤组相比，LUFE低、高剂量组细胞细胞色素c、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3的表达均减少，并随着剂量的增加，其表达程度越低。
讨 论
综上所述，LUFE对酒精所致的血管内皮细胞有保护作用，其机制可能与其抗氧化、抑制酒精诱导的线粒体途径细胞凋亡有关。
