北华大学药学院的叶玉洁、石光、发丽萍*和杜培革*等人对桑黄液体发酵菌丝体和野生桑黄子实体的基本营养成分、氨基酸和微量元素的组成,以及多糖、黄酮类、三萜类物质含量进行对比分析和评价,为桑黄作用的物质基础研究提供理论和实践依据,以期获得桑黄菌更重要的应用价值和更为广阔的开发前景。
1 桑黄菌丝体培养
PDA固体培养基中可观察到桑黄菌丝体生长新区呈锯齿状(曲线所示),轻微升起的气生菌丝体延伸到生长区的边缘(箭头所示),菌落白色至微带奶油黄色、黄褐色、蜜黄色边缘绒毛状,反面无变化(图1A);较老的部位为棉花状和羊毛状、毡状,反面奶油黄色至黄褐色(图1B)。PDB液体培养基中可观察到桑黄菌丝体呈菌丝球状态(图1C),菌丝形态特征一致,均为多分支,可见菌丝横隔,无锁状联合(图1D)。
2 主要营养成分含量比较分析
桑黄菌丝体和子实体主要营养成分含量比较结果显示,菌丝体水分、灰分含量显着低于子实体(P<0.05),粗纤维含量极显着低于子实体(P<0.01),但粗脂肪和粗蛋白含量极显着高于子实体(P<0.01),均具有统计学意义。
3 氨基酸含量分析
结果显示,在所测定的17 种氨基酸中,桑黄菌丝体和子实体均含有人体必需的多种氨基酸,氨基酸种类齐全。桑黄菌丝体氨基酸总量为25.11%,子实体氨基酸总量为4.69%,桑黄菌丝体氨基酸总量高于子实体,且所检测出的17 种氨基酸含量均高于子实体,其中菌丝体中Glu含量最高,为2.86%;子实体中Met含量最高,为0.66%。所检出的7 种人体必需氨基酸Thr、Val、Met、Ile、Leu、Phe、Lys总量分别占菌丝体、子实体氨基酸总量的38.99%、46.70%。
4 矿物元素分析
采用ICP-AES法快速测定Li、Na、Mg、Al、P、K、Ca、Ti、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、As、Se、Sr、Mo、Cd、Sn、Ba、Hg、Pb共24 种元素,检出K、Ca、Na、Mg、Al、Zn、Fe、Cu、Mn、Ba、P、Cr、Sr共13 种元素,结果表明,菌丝体含K 98.440 0 mg/kg、Ca 239.281 0 mg/kg、Na 543.685 0 mg/kg、Mg 269.744 0 mg/kg、Al 2 2 4.4 2 7 0 m g/k g、Z n 2 1.6 1 5 0 m g/k g、F e 212.222 0 mg/kg、Cu 27.063 8 mg/kg、Mn 4.112 6 mg/kg、Ba 1.845 9 mg/kg、P 13 767.400 0 mg/kg、Cr 5.536 5 mg/kg、Sr 0.897 4 mg/kg;子实体含K 130.211 0 mg/kg、Ca 581.768 0 mg/kg、Na 57.718 8 mg/kg、Mg 349.221 0 mg/kg、Al 332.118 0 mg/kg、Zn 14.907 2 mg/kg、Fe 97.928 4 mg/kg、Cu 9.860 7 mg/kg、Mn 88.248 9 mg/kg、Ba 1.242 4 mg/kg、P 5 509.630 0 mg/kg、Cr 4.451 8 mg/kg、Sr 5.640 6 mg/kg,其中矿物元素含量比较分析如图2所示。
5 主要功能成分比较分析
5.1 主要功能成分含量比较分析
结果显示,桑黄子实体主要功能成分均高于菌丝体,其中桑黄多糖质量分数最高,为30.48%。
5.2 主要功能成分活性比较分析
结果显示,质量浓度在1.25 mg/mL时多糖达到最高清除率为77.14%,质量浓度在0.625 mg/mL时黄酮达到最高清除率为61.37%,质量浓度在1.25 mg/mL时三萜达到最高清除率为49.97%。
与对照组相比,不同质量浓度桑黄菌丝体、子实体多糖SW620和HepG2细胞抑制率比较差异具有统计学意义(P<0.05)。
结 论
桑黄菌丝体中水分、灰分、粗纤维含量显着或极显着低于子实体,但菌丝体中粗脂肪、粗蛋白含量极显着高于子实体(P<0.01);因为蛋白含量的显着差异,导致桑黄菌丝体和子实体氨基酸含量差异较大,但二者均含有17 种氨基酸,种类丰富,且菌丝体氨基酸总量为25.11%,高于子实体氨基酸总量,可提供人体必需多种氨基酸,维持机体免疫力。此外,两者均含有多种有益矿物元素,共检测出13 种微量元素,其中包含Al、Na、Mg、Ca、K、P六种人体必需常量元素,Fe、Zn、Cu、Mn、Cr、Se六种人体必需微量元素。
利用DPPH自由基体外清除率测定比较桑黄子实体中3 种主要功能成分的活性,分析得出桑黄多糖抗氧化活性较好;进一步通过细胞增殖实验,对桑黄菌丝体、子实体多糖活性进行比较,结果表明与野生桑黄子实体相比,菌丝体功能成分活性较低,其中多糖成分活性较好,具有抗氧化、抗肿瘤细胞增殖等功效。研究表明液体发酵所得桑黄菌丝体同样具有较高营养价值和开发价值,可为桑黄的进一步深入研究提供基本数据。