为进一步研究DBSP对神经细胞缺氧性凋亡的保护机制，来自南昌大学食品科学与技术国家重点实验室的张贤益、李文娟和钟亮等人通过培养原代胎鼠大脑皮层神经细胞，建立A/R模型，即先用含糖培养液培养神经细胞，在氮气、氧气以及二氧化碳培养箱中进行缺氧处理，最后灌注复氧，加入DBSP处理A/R损伤的胎鼠大脑皮层神经细胞，与正常对照组比较细胞活性以及凋亡水平，同时使用流式细胞仪检测相应乳酸脱氢酶（LDH）、活性氧（ROS）、线粒体膜电位及Ca2＋相对浓度的变化，来探究DBSP对体外培养的A/R损伤神经细胞的保护机制，并根据阻断剂组（LY294002＋DBSP＋A/R）研究PI3K-Akt信号通路对DBSP的神经保护产生的介导作用。
1. DBSP对神经细胞活力的影响
与对照组相比，A/R组中神经细胞活力由1.270下降到0.850，极显着下降，表明神经细胞A/R损伤明显。与A/R组相比，DBSP＋A/R中神经细胞活力由0.850上升到1.120，极显着增加，表明DBSP对神经细胞A/R损伤具有明显的保护作用。
2. DBSP对神经细胞LDH释放
的影响
与对照组相比，A/R组中LDH的释放由17.21 U/L上升到27.52 U/L，极显着增加，表明神经细胞损伤。与A/R组相比，DBSP＋A/R组中LDH的释放水平由27.52 U/L下降到17.33 U/L，极显着下降，表明DBSP对受A/R损伤的神经细胞具有保护作用。
3. DBSP对神经细胞Ca2＋相对
浓度的影响
与对照组相比，A/R组中神经细胞Ca2＋相对浓度由19.30上升到194.91，极显着增加。而DBSP＋A/R组与A/R组相比，细胞中的Ca2＋相对浓度由194.91下降至22.37，极显着降低，表明DBSP可抑制A/R介导的Ca2＋相对浓度增加。
4. DBSP对神经细胞凋亡的影响
与对照组相比，A/R组中细胞凋亡率由5.03%增至46.68%，细胞凋亡率极显着增加，表明A/R可促进神经细胞的凋亡。而与A/R组相比，DBSP＋A/R组细胞凋亡率由46.68%下降至18.17%，表明DBSP处理神经细胞后，A/R介导的细胞凋亡显着减少。
5. DBSP对神经细胞ROS相对含量
的影响
与对照组相比，A/R组中神经细胞ROS相对含量由94.69上升至154.88，极显着增加，而DBSP＋A/R组与A/R组相比，细胞中的ROS相对含量由154.88下降至110.76，极明显减少，表明DBSP可抑制A/R介导的神经细胞ROS相对含量的增加。
6. DBSP对神经细胞线粒体膜电位
的影响
与对照组相比，A/R组中神经细胞的线粒体膜电位由138.81下降至91.73，极明显降低，表明神经细胞受A/R损伤，与A/R组相比，DBSP+A/R组中线粒体膜电位由91.73上升至126.84，极显着增加。结果表明DBSP对A/R介导的神经细胞损伤具有保护作用。
7. DBSP对神经细胞中
T-Akt和p-Akt的蛋白表达影响
与对照组相比，各组之间T-Akt的蛋白表达无显着差异（P＞0.05）。神经细胞经DBSP处理后，与A/R组相比，p-Akt蛋白表达上调，给予PI3K-Akt信号转导通路阻断剂LY294002后抑制了DBSP介导的p-Akt蛋白表达。
结 论
从细胞活性来看，A/R组比对照组明显降低（P＜0.01），表明A/R对神经细胞产生了损伤。同时，与A/R组相比，DBSP＋A/R组细胞活性显着上升、细胞凋亡明显减少（P＜0.01），乳酸脱氢酶的释放水平下降，表明DBSP对受A/R损伤的神经细胞产生保护作用，进一步结果显示，与A/R组相比，DBSP＋A/R组中Ca2＋相对浓度和活性氧生成显着降低、显着增加线粒体膜电位和p-Akt蛋白表达（P＜0.01）。而与DBSP＋A/R组相比，LY294002＋DBSP＋A/R组中p-Akt蛋白表达显着减少（P＜0.01），同时细胞活性与线粒体膜电位下降，且LDH的释放水平、Ca2＋相对浓度、活性氧、细胞凋亡明显增加（P＜0.05），表明DBSP对神经细胞的保护作用受到PI3K-Akt信号通路抑制剂LY294002的抑制作用而被削弱。结论：DBSP可通过PI3K-Akt信号转导通路抑制神经细胞的缺氧性凋亡。
