1.TAENN对ALF小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量的影响
与正常组比较,ALF模型组小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量均极显着升高(P<0.01)。与模型组相比,TAENN剂量依赖性地下调ALF小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量(P<0.01)。以上实验结果说明,在ALF模型小鼠中,血清炎症因子水平明显提高,TAENN可缓解这一病变。
2. TAENN对ALF小鼠肝脏中TNF-α、IL-1β和IL-6含量的影响
与正常组比较,ALF模型组小鼠肝脏中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量均明显升高(P<0.01)。与模型组相比,TAENN组小鼠肝脏中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量极显着降低(P<0.01)。以上研究结果显示,在ALF模型小鼠中,肝脏炎症因子的含量显着增加,TAENN剂量依赖性地降低了ALF小鼠肝脏中的炎症因子含量。
3. TAENN对ALF小鼠肝脏中TNF-α、IL-1β和IL-6mRNA表达的影响
与正常组比较,ALF模型组小鼠肝脏中TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平均极显着增加(P<0.01)。TAENN剂量依赖性地抑制了ALF模型小鼠肝脏中这些炎症因子编码基因的转录(P<0.01)。以上研究结果提示,在ALF小鼠模型的肝脏中,炎症因子编码基因的转录水平明显高于正常组;TAENN能有效抑制ALF小鼠肝脏中炎性因子基因的转录。
4. LPS/GalN处理对小鼠肝脏炎症介质和NF-κB信号通路的影响
与正常组相比,模型组小鼠肝脏组织中NO、PGE2等炎症介质相对含量增加明显(P<0.01);iNOS和COX-2分别是在NO和PGE2合成过程中起到关键作用的酶。iNOS、COX-2的mRNA和蛋白相对表达水平均显着升高(P<0.01);不仅如此,在模型组中p65蛋白的磷酸化水平亦明显上升( P < 0 . 0 1 ) 。以上结果提示, 核转录因子-κB(NF-κB)信号通路激活与炎症介质分泌在LPS/GalN联合诱导肝脏炎症反应的过程中起到重要作用。
5. TAENN对ALF小鼠肝脏中NO、PGE2含量的影响
与模型组相比,TAENN组小鼠肝脏中NO和PGE2的相对含量显着降低。降低程度与给药剂量呈正相关关系。TAENN各剂量组数据差异极显着(P<0.01)。以上结果说明,TAENN能有效降低ALF小鼠肝脏中炎症介质的含量。
6. TAENN对ALF小鼠肝组织iNOS、COX-2 mRNA和蛋白表达的影响
TAENN剂量依赖性地抑制了ALF小鼠肝脏中iNOS和COX-2基因的转录和蛋白表达,差异极显着(P<0.01)。TAENN剂量依赖性地下调了ALF模型小鼠肝脏中p65蛋白的磷酸化水平(P<0.01)。以上研究结果提示,TAENN可通过抑制NF-κB而下调炎症介质相关基因的表达,这些分子事件与TAENN与LPS/GalN联合诱导小鼠肝脏ALF反应的缓解作用密切相关。
结 论
与模型组相比,TAENN组小鼠血清与肝脏中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显降低(P<0.01)。肝脏中炎症介质NO和PGE2水平亦有极显着下降(P<0.01)。经TAENN处理后,模型小鼠肝脏中TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS、COX-2等的mRNA表达水平明显下降(P<0.01)。此外,iNOS和COX-2的蛋白表达水平明显降低(P<0.01),p65蛋白本身的表达水平不变,但其536位丝氨酸的磷酸化水平亦极显着下降(P<0.01)。结论:TAENN对LPS/GalN诱导小鼠急性肝衰竭相关的炎症反应具有明显的保护作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路并减少炎症因子和炎症介质相关基因的表达有关。